Caspase 3/7 and Annexin V Double Staining Apoptosis Kit

货号：GCQ0086

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100 Assays 20 Assays

检测原理	Caspase 3/7 Substrates(Green)采用新型的具有细胞膜通透性的Caspase-3/7绿色荧光底物，可实时检测活细胞中Caspase-3/7酶的活性，且不会抑制细胞的凋亡进程。染色的细胞呈绿色荧光，可用流式细胞仪FL1或FITC检测通道检测，也可使用荧光显微镜488nm 激发波长进行观测分析。 Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生凋亡时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻到膜表面，而被荧光染料APC标记的 Annexin V 结合，使细胞呈红色荧光，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。 Caspase 3/7 Substrates(Green)和Annexin V-APC Reagent共同染色凋亡细胞，可实时检测细胞凋亡进程中细胞内Caspase 3/7酶活和细胞表面磷脂酰丝氨酸的的动态变化。
检测方法	荧光法;流式
样本类型	细胞
检测时间	0.5 hour
检测仪器	流式细胞仪;荧光显微镜
荧光	FITC;APC
Ex/Em	Caspase 3: Ex/Em=490nm/535nm; Annexin V:Ex/Em=650nm/660nm
Channel set	FITC;APC
自备试剂	PBS缓冲液;细胞培养基
保存温度	该产品可在2~8℃避光保存1年。
有效期	12个月
运输条件	冰袋

10μM的camptothecin 诱导Hela细胞24h后，使用Caspase 3/7 and Annexin V Double Staining Apoptosis Kit染色后使用荧光显微镜拍照，Caspase 3/7染色结果为绿色，展示发生凋亡并激活caspase 3/7酶活的凋亡细胞；Annexin V染色为红色，展示早凋和晚凋中发生磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻的凋亡细胞。

MOLT-4细胞用5μM的camptothecin (右) 或未加药(左) 处理 4 h，本试剂盒染色后流式检测。Annexin V单阳细胞（Q3-1）为发生PS外翻的早凋细胞，Annexin V和Caspase 3/7双阳细胞（Q3-2）为早中晚期Caspase 3/7活性较高的凋亡细胞，Annexin V和Caspase 3/7双阴细胞（Q3-3）为未发生凋亡的活细胞，Caspase 3/7单阳细胞（Q3-4）为发生Caspase 3/7酶激活的早凋细胞。

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