Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (with JC-1)

  • 货号:GCQ0047
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100 Assays 50 Assays 20 Assays
检测原理
线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位 Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在形式,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体,可产生绿色荧光。 通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可检测到细胞膜电位的下降,可将JC-1荧光颜色的转变作为细胞凋亡早期的检测指标。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。 JC-1单体的最大激发波长为514 nm,最大发射波长为529 nm;JC-1聚合物的最大激发波长为585 nm,最大发射波长为590 nm。实际观察时,常规设置红色荧光和绿色荧光即可。
检测方法
荧光法;流式
样本类型
细胞
检测时间
40min
检测仪器
流式细胞仪;荧光显微镜
荧光
JC-1
Ex/Em
514/529, 585/590
Channel set
FITC, PE
自备试剂
超纯水
保存温度
该产品可在2~8°C/-20°C避光条件下保存12个月,具体试剂组分的保存条件请参考说明书。
有效期
12个月
运输条件
冰袋
本试剂盒检测喜树碱诱导的Jurkat细胞凋亡效果如图所示:正常细胞(左)存在少量凋亡,表现为出现少量线粒体膜电位崩塌细胞;诱导凋亡细胞(中, 2.5 μM喜树碱处理Jurkat细胞24 h)出现大量线粒体膜电位崩塌细胞;CCCP处理细胞(右,阳性对照)几乎所有细胞线粒体膜电位崩塌。
本试剂盒检测Hela细胞的线粒体膜电位变化:control(上),表现为极少量凋亡细胞;10 μM camptothecin(下)处理Hela细胞24 h,出现大量线粒体膜电位崩塌的凋亡细胞。
本试剂盒检测Hela细胞的线粒体膜电位变化:control(上),表现为少量线粒体膜电位崩塌细胞;10 μM CCCP(下)处理Hela细胞40 min,出现大量线粒体膜电位崩塌细胞。
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