cAMP(Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit
中文名称:环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫吸附测定试剂盒

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- 反应性: Universal
- 检测范围: 1.56-100 ng/mL
- 灵敏度: 0.94 ng/mL
产品应用 | ELISA |
检测原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用cAMP抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的cAMP与包被的cAMP竞争生物素标记的抗cAMP单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,cAMP浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中cAMP的浓度。 |
反应类型 | Competitive-ELISA |
规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
反应时间 | 2 h 30 min |
反应性 | Universal |
检测方法 | 比色法;ELISA;竞争法 |
检测范围 | 1.56-100 ng/mL |
灵敏度 | 0.94 ng/mL |
样本体积 | 50 μL |
样本类型 | 血清、血浆或其他生物体液 |
特异性 | 可检测样本中的cAMP,且与其它类似物无明显交叉反应 |
精密度 | 板内,板间变异系数均<10% |
回收率 | 80%-120% |
储存条件 | 2-8℃ |
有效期 | 12个月 |
数据处理 |
-
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Q1:我看文献里用竞争ELISA试剂盒测cAMP浓度时,用的是0.1M的HCl裂解的细胞,咱们可以用吗?
我们推荐您参考说明书中细胞样本处理方法而不建议使用0.1M的HCl裂解细胞。
由于0.1M盐酸理论上只能使细胞的通透性改变,无法裂解细胞,同时强酸的引入,会导致蛋白的变性,从而影响抗原抗体的结合,以及改变ELISA实验体系的pH值,最终影响实验结果。
Q2:我看文献里用竞争ELISA试剂盒测cAMP浓度时,用的是0.1M的HCl裂解的细胞,咱们可以用吗?
可以检测细胞样本,您可以参考其他指标的细胞样本处理方法; 理论上神经元细胞用胰酶消化也是可以的;0.1M盐酸不适用于裂解细胞,首先这个浓度的盐酸应该只能使细胞的通透性改变,无法裂解细胞,其次强酸的引入,会导致蛋白的变性,从而影响抗原抗体的结合,以及改变ELISA实验体系的pH值,最终影响实验结果。
Q3:请问血清样品稀释可以用DD水吗
不能的,需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。
Q4:说明书中的双蒸水可以用纯化水/超纯水/灭菌注射用水/哇哈哈/屈臣氏蒸馏水代替吗
纯水不可以,超纯水/灭菌注射用水/哇哈哈/屈臣氏蒸馏水都可以,但请注意购买的瓶装水尽量现开现用,避免存在污染
Q5:细胞裂解液需要先BCA定量后再做ELISA吗
蛋白定量没有具体要求,选做
Q6:神经递质的试剂盒有吗?大鼠的 咱们有推荐的吗?
脑内神经递质分为四类,即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质,它不以胞吐的方式释放,而是凭借其溶脂性穿过细胞膜,通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。
Q7:检测组织匀浆上清时,是否需要将组织匀浆上清稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样?
不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样,可以将组织样本制成10%组织匀浆上清,然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度,再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度,来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度(pg/mg prot或者ng/mg prot)。
Q8:有的指标试剂盒定价为3200,是因为抗体对更贵吗
常规试剂盒中定价3200的指标一般是相对来说市面上相对不太常见的指标,在原料筛选和工艺研发上会更加困难一些,开发成本偏高,所以定价会比常见指标要贵一点
Q9:有可以测植物或者是微生物样本ELISA试剂盒吗?
目前我们的ELISA试剂盒仅适用于动物样本,没有用于检测植物/微生物样本的试剂盒
Q10:我需要测毛发里面的皮质酮和睾酮,有没有一些样本提取的步骤呢?
头发样本制备方法:
头发样本用甲醇清洗,在每个样品中加入5 mL高效液相色谱(HPLC)级甲醇,旋转3分钟,然后倒入多余的甲醇,将头发洗两次。洗发后,将头发样本放在铝箔上,在防护帽中干燥3天。称量干燥的头发样本,并转移到含有不锈钢研磨珠的2ml聚丙烯管中。将含有头发和磨珠的试管放入搅珠器中,每个样品研磨2分钟以产生粉末。研磨后,在装有头发粉的试管中加入1.5 mL甲醇,样品缓慢旋转孵育24小时以提取类固醇。10000 g离心4 min,将0.6 mL含类固醇的甲醇上清转移到新的1.5 mL微离心管中。样品在防护罩中干燥2-3天以蒸发甲醇。蒸干提取物用0.4 mL试剂盒中的稀释液稀释后检测
