cAMP(Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit
中文名称：环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫吸附测定试剂盒
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- 反应性： Universal
- 检测范围： 1.56-100 ng/mL
- 灵敏度： 0.94 ng/mL
| 产品应用 | ELISA |
| 检测原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用cAMP抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的cAMP与包被的cAMP竞争生物素标记的抗cAMP单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，cAMP浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中cAMP的浓度。 |
| 反应类型 | Competitive-ELISA |
| 规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
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| 反应时间 | 2 h 30 min |
| 反应性 | Universal |
| 检测方法 | 比色法;ELISA;竞争法 |
| 检测范围 | 1.56-100 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.94 ng/mL |
| 样本体积 | 50 μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他生物体液 |
| 特异性 | 可检测样本中的cAMP，且与其它类似物无明显交叉反应 |
| 精密度 | 板内，板间变异系数均<10% |
| 回收率 | 80%-120% |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 有效期 | 12个月 |
| 数据处理 |
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IF: 8.700 -
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Q1:我看文献里用竞争ELISA试剂盒测cAMP浓度时，用的是0.1M的HCl裂解的细胞，咱们可以用吗？
我们推荐您参考说明书中细胞样本处理方法而不建议使用0.1M的HCl裂解细胞。
由于0.1M盐酸理论上只能使细胞的通透性改变，无法裂解细胞，同时强酸的引入，会导致蛋白的变性，从而影响抗原抗体的结合，以及改变ELISA实验体系的pH值，最终影响实验结果。
Q2:我看文献里用竞争ELISA试剂盒测cAMP浓度时，用的是0.1M的HCl裂解的细胞，咱们可以用吗？
可以检测细胞样本，您可以参考其他指标的细胞样本处理方法； 理论上神经元细胞用胰酶消化也是可以的；0.1M盐酸不适用于裂解细胞，首先这个浓度的盐酸应该只能使细胞的通透性改变，无法裂解细胞，其次强酸的引入，会导致蛋白的变性，从而影响抗原抗体的结合，以及改变ELISA实验体系的pH值，最终影响实验结果。
Q3:请问血清样品稀释可以用DD水吗
不能的，需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。
Q4:细胞裂解液需要先BCA定量后再做ELISA吗
蛋白定量没有具体要求，选做
Q5:神经递质的试剂盒有吗？大鼠的 咱们有推荐的吗？
脑内神经递质分为四类，即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质，它不以胞吐的方式释放，而是凭借其溶脂性穿过细胞膜，通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。
Q6:检测组织匀浆上清时，是否需要将组织匀浆上清稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样？
不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样，可以将组织样本制成10%组织匀浆上清，然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度，再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度，来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度（pg/mg prot或者ng/mg prot）。
Q7:有可以测植物或者是微生物样本ELISA试剂盒吗？
目前我们的ELISA试剂盒仅适用于动物样本，没有用于检测植物/微生物样本的试剂盒
Q8:我需要测毛发里面的皮质酮和睾酮，有没有一些样本提取的步骤呢？
头发样本制备方法：
头发样本用甲醇清洗，在每个样品中加入5 mL高效液相色谱(HPLC)级甲醇，旋转3分钟，然后倒入多余的甲醇，将头发洗两次。洗发后，将头发样本放在铝箔上，在防护帽中干燥3天。称量干燥的头发样本，并转移到含有不锈钢研磨珠的2ml聚丙烯管中。将含有头发和磨珠的试管放入搅珠器中，每个样品研磨2分钟以产生粉末。研磨后，在装有头发粉的试管中加入1.5 mL甲醇，样品缓慢旋转孵育24小时以提取类固醇。10000 g离心4 min，将0.6 mL含类固醇的甲醇上清转移到新的1.5 mL微离心管中。样品在防护罩中干燥2-3天以蒸发甲醇。蒸干提取物用0.4 mL试剂盒中的稀释液稀释后检测
Q9:我的样本体积不过，可以少加一些，然后其他试剂等比例减少吗？
不可以，我们试剂盒的检测体系要严格按照要求上样量加样才能保证准确检测
如果样本体积不够可以考虑适当稀释，但需要先进行预实验确认稀释倍数是否合适
Q10:我买了你家的试剂盒，货号为E-ELIR-K001，我现在需要用自己合成的抗原包板，一抗是抗原免疫的小鼠血清，二抗是HRP Goatanti Mouse lgG(H+L)，请问我的抗原，一抗，以及二抗分别需要用什么来稀释为工作浓度呢？
抗原用包被液稀释，一抗用通用型样本稀释液或者即用型生物素化抗体稀释液，二抗用即用型HRP酶结合物稀释液体。
实验操作视频
