产品常见问题
为了提供更好的客户支持,我们已经发布了关于Elabscience®产品的最常见问题的解答(FAQs)。
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NCBI中angiotensin II [Homo sapiens]GenBank: CAA77513.1中显示Uniprot的固定编号"P30556"的蛋白是"Type-1 angiotensin II receptor",为血管紧张素 II 1 型受体,与血管紧张素Ⅱ不是同一蛋白;
Uniprot数据库由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大子数据库构成,数据主要来自于各物种基因组测序完成后得到的全基因蛋白质序列,并包含了很多来自文献中的蛋白及其功能信息。NCBI(美国国家生物技术信息中心)的数据资源来自全球几大DNA数据库,其中包括日本DNA数据库DDBJ、欧洲分子生物学实验室数据库EMBL以及其它几个知名科研机构,两者信息来源可能不一致,有时候在名称方面没有严格审核,可能有一定的出入。该指标测得是所有亚型的IFNα,也就是总的IFNα。标准品并不是所有亚型的混合物,而是人源的IFN-alpha 2a (重组蛋白,表达体系:HEK293细胞)。但由于人的15种IFN-α亚型同源性高达80%,所以我们试剂盒中所用到的抗体可识别所有亚型,另外这款试剂盒对不同亚型的IFNα做过验证,均是可以检测到的。由于试剂盒中的抗体识别的是活化TGF-β,而TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量的12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-β cDNA序列研究表明,单体的TGF-β的112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体份子(per-pro-TGF-β)从羧基端裂解而来。per-pro-TGF-β N端含有一个信号肽,在分泌前被裂解掉,成为非活性状态的多肽链前体(pro-TGF-β),通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基,所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-β。
机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-β。在体外,非活性状态的TGF-β又称为latency associated peptide(LAP),通过酸化可被活化。在体内,酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口,蛋白本身的裂解作用可使TGF-β复合体变为活化TGF-β。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的活化的TGF-β,如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞等。因此,通常组织样本检测时不需要额外活化处理。这两款试剂盒可以用于您的细胞上清的检测的。不过ELISA检测细胞上清受到培养基组分、细胞生长情况、以及外部药物刺激条件等因素的影响,建议您正式实验前先开展预实验。
明胶酶谱法是利用SDS与样品中的MMPs的可逆性结合,将样本中的MMP-2和MMP-9分离,再通过二价金属离子缓冲体系恢复两者的活性,该试验方法是专门针对MMP-2和MMP-9的活性检测的。而ELISA是通过抗原抗体的结合反应去检测待测物的含量(即浓度),即通过MMP-2和MMP-9的特异性抗体去捕获样本的MMP-2和MMP-9。两者的实验原理不同,ELISA无法检测MMP-2和MMP-9的活性。VEGFA (VEGF)有多种亚型(剪切异构体),其中VEGF165是VEGFA最丰富和有效的亚型(P15692-4),VEGF165试剂盒检测为VEGF165A,而VEGF165B是另外一种剪切体(P15692-8)。胶原蛋白(COL1)由三条肽链组成,其中有两条链,分别是α(Ⅰ)链即COL1α1,一条 α(Ⅱ)链即COL1α2. 这两者的同源性达60.396%,不会发生明显的交叉反应。uPAR是uPA的膜结合受体,也被称为尿激酶和玻璃联素。suPAR是由膜结合的uPAR的分裂和释放引起的,是uPAR的可溶性形式。该试剂盒检测的是总的uPAR,包括膜形式及可溶性形式。哺乳动物中,APP基因位于21号染色体,共有8个亚型,其亚型一般含有365~770个氨基酸残基。最常见的是APP695、APP751和APP770,其中APP695在中枢神经中高度表达。APP属I型跨膜糖蛋白,分子量约110~130 kDa,具有较大的膜外(氨基端)结构域和较小的胞质尾区(胞内羧基端)。APP主要通过淀粉样(β途径)和非淀粉样(α途径)2种途径进行代谢。淀粉样途径即APP被β分泌酶切割成为sAPPβ和1个含有99个氨基酸的C端片段;后者进一步被γ分泌酶切割成为Aβ和ACID,这种途径生成的Aβ占Aβ总量的90%~95%,包括Aβ1-40和Aβ1-42 2种类型,其中Aβ1-40的含量较高,但Aβ1-42具有强疏水作用,其毒性较大,而且易于聚合。这些Aβ碎片会在线粒体、溶酶体以及内质网中积累,从而导致这些亚细胞器功能失调。在基于α分泌酶的非淀粉质源途径中,α分泌酶将APP切割为sAPP和1个含有83个氨基酸的C端片段,然后被γ分泌酶切割产生P3和ACID,但这些小的片段会被神经元清除掉。
APP基因突变可引起蛋白表达异常或水解改变,从而影响Aβ在细胞中的含量和组成变化。Aβ在脑内主要以Aβ40和Aβ42 2种形式存在,其中Aβ42含量虽低(<10%),但易于聚合,进而纤维化而沉积,从而形成弥散性老年斑(senile plaque),这也是AD的主要病理特征之一。而且,APP在细胞膜上经β-和γ-分泌酶切割后产生的Aβ可以引起氧化应激、钙离子内流,进而损伤线粒体,导致神经细胞障碍,激活凋亡相关蛋白和因子,最终启动细胞的凋亡程序。另外,Aβ还可以通过引起脑内炎症反应和神经纤维缠结间接导致神经元凋亡,是AD形成和发展的重要原因。大多数物质在冷冻条件下可以相对稳定,但建议使用新采集的样品进行检测,以获得更准确的结果。归纳起来PAF检测有三大类方法:①生物学检测法;②理化法;③免疫学方法。ELISA检测建议在血浆样品中加入1mM TPCK或TLCK,以抑制PAF-AH的活性。这两种属于不同类型的前列腺素。
前列腺素E2 (PGE2)是最丰富的前列腺素,是由前列腺素E合成酶作用于前列腺素H2(前列腺素H2, PGH2)产生的。
前列腺素D2(PGD2)是另外一种前列腺素,由造血和脂蛋白前列腺素D合成酶(hPGDS和lPGDS) 作用于前列腺素H2(前列腺素H2, PGH2)产生的。
除此之外,这两者的受体以及研究领域不同
PGE2:主要研究胃肠道平滑肌
PGD2:主要研究过敏性疾病如哮喘我们推荐您参考说明书中细胞样本处理方法而不建议使用0.1M的HCl裂解细胞。
由于0.1M盐酸理论上只能使细胞的通透性改变,无法裂解细胞,同时强酸的引入,会导致蛋白的变性,从而影响抗原抗体的结合,以及改变ELISA实验体系的pH值,最终影响实验结果。血小板具有特定的形态结构和生化组成,在正常血液中有较恒定的数量,在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理过程中有重要作用。血小板只存在于哺乳动物血液中。我们这边检测正常大鼠血清血浆的血小板素时没有空腹要求。结合文献中的情况,一般是给药24h后检测大鼠血清血浆的血小板生成素,未提到大鼠要禁食的要求。建议您可以根据实验目的和文献进行参考选择。含酚红的培养基可能对睾酮检测有影响。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应及对细胞的毒性作用,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。
介绍一个小窍门:培养基在分装时,留一管加酚红,放到培养箱内平衡(可以看出PH值的变化,又可以看培养基是否污染)。在培养前放到培养箱内平衡再使用(可以避免培养时使用酚红)。ApoE基因模型认为ApoE的合成是由位于一个基因位点上的三个等位基因所控制,即E2、E3和E4,每一个等位基因对应于一个主要异构体产生三种纯合子(E2/2,E3/3,E4/4)和三种杂合子(E2/3,E2/4,E3/4)共六种常见表型。ApoE 3/4为基因水平,ELISA试剂盒检测的是蛋白水平的APOE的含量,无法反应出基因层面的APOE3/4的表达。PGI2极不稳定,在pH为7.48的水溶液中,半衰期只有14. 5 min。在中性介质中,它也能水解成6-酮PGFla。
试剂盒设计是PGI2,但因为PGI2在生物体液样本中相对不稳定,因此我们设计的抗体对其代谢产物6-酮PGFla也具有交叉反应,目的在于通过检测6-酮PGFla和PGI2的含量反应总的PGI2量。Cytochrome-C:最丰富、最稳定的细胞色素,主要参与能量转移;
Cytochrome P450 aromatase :一种细胞色素P450单加氧酶,催化C19雄激素、雄激素-4-烯-3,17-二酮(雄烯二酮)和睾酮分别转化为C18雌激素、雌酮和雌二醇。这两个检测的是不同的指标,其中E-EL-H0835检测的是Human CTXⅠ的 1196-1218aa;E-EL-H0960检测的是Human β-CTx的1207-1214aa,并且这两者功能不同,其中CTXⅠ是Ⅰ型胶原的降解指示剂;而β-CTx是骨重吸收评价指标。sC5b-9试剂盒检测的是总的,包括激活与未激活形式。
MAC是存在于细胞上的,但是当多功能糖蛋白S蛋白(vitronectin)与C5b9的液相结合时,可形成一种不能附着在细胞上的复合体,即SC5b9。
SC5b-9是存在于血浆中的膜攻击复合物,在其浓度异常升高时,表现出细胞毒性,它与细胞骨架成分或膜蛋白发生作用产生对细胞的非致死性作用,其在某些疾病的病理过程中起重要作用。
这款试剂盒检测的是sC5b-9的浓度,一般用于研究sC5b-9指标相关的疾病模型中,可以呈现出组间浓度变化,但是不能代表细胞上MAC的形成过程。生物素是一个小分子,您标记的蛋白质分子量较大,由于空间位阻效应,被标记的生物素分子不一定能完全暴露出结合位点,从而导致检测到的生物素含量偏低。只要蛋白质分子上被标记的生物素分子能够暴露出来,我们的生物素定量试剂盒就可以检测到。样本中的IgA是可以检测到的,这主要是基于IgA和sIgA结构的重叠,会存在一定的交叉反应。
小鼠和人类的IgA生物学在几个方面有所不同。在人血清中,IgA主要以单体形式存在,而在小鼠血清中,IgA主要以聚合形式存在。此外,人类IgA可分为密切相关的IgAl和IgA2亚类,其中IgA2较不易被蛋白水解降解。在血清中,IgAl亚类占主导地位,而在分泌物中发现的主要亚型是IgA2,尽管IgAl和IgA2都可以检测到sIgA。白细胞介素(IL)-1细胞因子家族与免疫反应和炎症相关。它由以下11个不同的分子形式组成:细胞间IL-1α (IL-1F1)、细胞外IL-1β (IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra, IL-1F3),以及IL-18 (IL-1F4)、IL-33 (IL-1F11)、IL-36α(IL-1F6)、IL-36β(IL-1F8)、IL-36γ(IL-1F9)、IL-36Ra(IL-1F5)、IL-37 (IL-1F7)和IL-38 (L-1F10)。其中最重要的促炎细胞因子是IL-1β。它主要是由单核细胞和巨噬细胞产生的一种非活性物质31 kDa前体,白细胞介素-1β原(proIL-1β),在半胱氨酸蛋白酶IL -1转化酶(ICE)的作用下可生成一个17.5kDa成熟且具有生物活性的蛋白IL-1β,E-EL-M0037试剂盒检测的是成熟的IL-1β。肝功能相关有以下几种指标,供您参考
E-EL-H0556 人乳酸脱氢酶A(LDHA)酶联免疫吸附测定试剂盒
E-EL-H2598 人肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)酶联免疫吸附测定试剂盒
E-EL-H6105 人白蛋白(ALB)酶联免疫吸附测定试剂盒
E-EL-0076 胆红素(Bb)酶联免疫吸附测定试剂盒我们ELISA产品的二抗(检抗)都是HRP,目前应该是没有能测红细胞裂解液的
对于少量血红蛋白可以考虑在第一次洗板步骤中增加1-2次洗涤次数来减少影响,但除了血红蛋白之外,红细胞在破碎的过程中释放出的内源性的HRP酶等物质也会对底物起到催化的作用,所以还是不建议客户用这类样本进行检测因为组织样本在处理的过程中会有内源或外源的蛋白酶导致提取的蛋白降解,所以在处理时需要加入蛋白酶抑制剂保证目标蛋白的完整性。
如果客户在样本处理的过程中能保持样本低温且操作迅速,不加入蛋白酶抑制剂影响不会很大,制完样本之后需要及时检测,或马上分装冻存至-20℃或-80℃TGF-β1的序列保守性很高,在不同种属中结构差异极小,所以我们的试剂盒可以做到通用型的检测拭子采集后用500ul PBS洗脱,5000×g 离心 10 分钟(如果样本仍有浑浊,可尝试 10000×g 离心),离心后取上清检测6-羟基硫酸褪黑素(6-SMT)是褪黑素(Melatonin)的一种主要代谢活性产物,在分子结构上比褪黑素多一个羟基。
褪黑素的ELISA试剂盒理论上会对6-SMT也有一定的交叉识别,但不建议用于检测该指标循环瘦素就是指瘦素,循环是形容瘦素水平的循环波动目前我们的ELISA试剂盒仅适用于动物样本,没有用于检测植物/微生物样本的试剂盒不可以,我们试剂盒的检测体系要严格按照要求上样量加样才能保证准确检测
如果样本体积不够可以考虑适当稀释,但需要先进行预实验确认稀释倍数是否合适活化步骤中使用的样本和试剂只要比例和说明书一致即可我们IL-23的试剂盒是针对完整的异二聚体IL-23蛋白进行检测的,如果是单体的IL-23P19亚基蛋白的话,应该是测不到的我们的ELISA试剂盒目前还没有验证过是否适配于自动分析仪,说明书中提供的检测步骤均为手动操作
如果客户有相应需求,可以自行进行验证为了保证孵育阶段温度波动控制在1℃以内,推荐客户使用恒温箱进行孵育
如果确实因为条件限制无法使用恒温箱孵育,可以考虑使用水浴锅孵育,但需要注意避免酶标板被水浴用水污染
不建议使用摇床进行孵育,尤其是带转速的摇床胰高血糖素样肽-1 ( GLP-1 ) 是一种 30 或 31 个氨基酸长的肽激素,源自胰高血糖素原肽的组织特异性翻译后加工。初始产物 GLP-1 (1–37) 易于酰胺化和蛋白水解裂解,从而产生两种截短且等价的生物活性形式:GLP-1 (7–36) 和 GLP-1 (7–37) 。内源性 GLP-1 主要被二肽基肽酶 4 (DPP-4) 以及中性肽链内切酶 24.11 (NEP 24.11) 和肾脏清除快速降解,半衰期约为2 分钟。因此,只有 10-15% 的 GLP-1 完整地进入循环,导致空腹血浆水平仅为 0-15 pmol/L。
我们的GLP-1试剂盒针对完整GLP-1蛋白进行检测,没有办法检测其代谢产物
另外,有的客户为了防止GLP-1降解在会样本中加入格列汀(DPPIV抑制剂)和三氟乙酸,但我们并不建议添加有机试剂到样本中,这可能会对ELISA检测造成干扰。在生理条件下,α-syn主要以未折叠的单体形式存在,同时与促进snare复合物组装的膜结合形式和可以抵抗异常聚集的四聚体形式处于平衡状态。当α-syn的生成和清除之间的平衡被破坏时,单体会聚集形成低聚物,包括通路内低聚物和通路外低聚物。通路内低聚物倾向于形成原纤维,并最终组成成纤维。其他不能形成淀粉样纤维的低聚物被称为通路外低聚物。
E-EL-H0983人SNCα酶联免疫吸附测定试剂盒是针对单体α突触核蛋白进行检测的,其他形式的α突触核蛋白尚未验证是否可以检测到。VCAM-1是一种跨膜蛋白,它可以被部分水解进入到血液中,进入到血液中的部分即可溶性VCAM-1(sVCAM-1)
E-EL-H5587 Human VCAM-1试剂盒检测的是总的VCAM-1,包括膜蛋白和可溶性形式;而E-EL-H2166 Human sVCAM-1试剂盒则专门检测可溶性形式的sVCAM-1
如果您要检测细胞上清样本,那么建议您购买E-EL-H2166这个货号头发样本制备方法:
头发样本用甲醇清洗,在每个样品中加入5 mL高效液相色谱(HPLC)级甲醇,旋转3分钟,然后倒入多余的甲醇,将头发洗两次。洗发后,将头发样本放在铝箔上,在防护帽中干燥3天。称量干燥的头发样本,并转移到含有不锈钢研磨珠的2ml聚丙烯管中。将含有头发和磨珠的试管放入搅珠器中,每个样品研磨2分钟以产生粉末。研磨后,在装有头发粉的试管中加入1.5 mL甲醇,样品缓慢旋转孵育24小时以提取类固醇。10000 g离心4 min,将0.6 mL含类固醇的甲醇上清转移到新的1.5 mL微离心管中。样品在防护罩中干燥2-3天以蒸发甲醇。蒸干提取物用0.4 mL试剂盒中的稀释液稀释后检测铁调素(hepcidin)是一种由肝脏合成并分泌的富含半胱氨酸的抗菌多肽,它在免疫过程中能够大量表达参与免疫反应,并且在机体内铁平衡的调节中起到负性调节的作用。铁调素作为成熟的25个氨基酸肽,能够结合到膜铁转运蛋白上,诱导其发生内化和降解,进而控制铁的吸收和释放,从而维持血浆铁在正常水平。
至于铁调素-25,它主要是在肝脏中产生,通过蛋白质溶解切割前铁调素的C-端的25个氨基酸所产生的。这25个氨基酸即为铁调素的活性形式,能够执行其生物功能。随后,N-端的铁调素-25会转化为更小的多肽(大约20~24个氨基酸),这些多肽活性更低并且在尿液中累积。
综上所述,铁调素和铁调素25的主要区别在于它们的来源和形式。铁调素是原始的、未经修饰的多肽,而铁调素25则是铁调素的一个特定片段,具有特定的生物活性。在功能方面,两者都参与铁的调节,但铁调素可能涉及更广泛的生物过程。ICAM蛋白家族由五个成员组成,分别是ICAM-1到ICAM-5。已知它们在炎症和免疫反应中与白细胞整合素CD11/CD18(如LFA-1和巨噬细胞-1抗原)结合。
ICAM-1又叫做CD54,在静息的血管内皮细胞(VEC)上呈低水平表达,通过与血管内皮细胞表面上的特异性受体结合而发挥其生物学活性。
ICAM-4 (LW血型抗原)表达于红细胞、红系前体细胞和其他血细胞 (包括 T 和 B 细胞)上,维持红细胞表面和血管内皮之间的密切接触,也在各种正常和病理状态中发挥作用。
综上所述,ICAM-1和ICAM-4虽然都是免疫球蛋白超家族的成员,但它们在细胞黏附、免疫调节以及具体的生物功能方面存在显著的差异。ICAM-1主要在白细胞募集和炎症反应中起作用,而ICAM-4则更侧重于白细胞与红细胞之间的相互作用以及免疫细胞的活化和功能调节。试剂盒检测的是50kDa的活性肝素酶亚基该试剂盒检测的是完整的TG蛋白该试剂盒检测的是全长补体C5sLOX-1是LOX-1的可溶型形式,也就是LOX-1包含sLOX-1的氨基酸序列。
我们的E-EL-H1635c 这个试剂盒所用的免疫原是sLOX-1,所以是可以用来测分泌样本(例如血清血浆)中的sLOX-1,也可以测组织和细胞裂解液等样本中的膜蛋白形式。失活样本的蛋白构象已发生改变,有可能影响抗原抗体结合,因此我们无法保证ELISA检测结果,建议客户使用新鲜收集样本进行检测。E-EL-H1478 Human PTHrP ELISA(Uniprot:P12272)试剂盒适用于检测天然蛋白,Abaloparatide是人工合成的34个氨基酸多肽,是甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)的类似物,但需要考虑到空间构象的不同可能导致无法识别,因此试剂盒不一定能检测阿巴洛肽目前没有验证过仓鼠样本在小鼠试剂盒中的检测情况,且不是一个种属,不建议推荐检测。标准曲线不是一条直线(是类似直线的曲线)。线性拟合推荐使用Origin软件,或者其他含有4-PL(四参数logistic)函数模型的软件去拟合得到标准曲线。4-PL拟合方式能够更精确的反映浓度和吸光度的线性关系,从而更准确地获得样品中待测物质的浓度值。E-EL-H6185 Human IgG1 ELISA Kit该试剂盒公司检测正常小鼠血清的交叉反应率低于2%,交叉反应性较低。肺表面活性物质相关蛋白(Pulmonary surfactant-associated protein,SP)分为SP-A、SP-B、
SP-C和SP-D。SP-A是肺表面活性物质(Pulmonary Surfactant,PS)。SP-A基因包含有SP-A1
和SP-A2;SP-A多数来源于SP-A1的转录表达。E-EL-M3009 Mouse Aβ1-40(Amyloid Beta 1-40) ELISA Kit检测的是Aβ1-40,
E-EL-M3010 Mouse Aβ1-42(Amyloid Beta 1-42) ELISA Kit 检测的是Aβ1-42,Aβ1-40 含量一般高于Aβ1-42,但是Aβ1-42与AD疾病发生密切相关。
Aβ单体本身是可溶的,Aβ可聚集成寡聚体或者纤维,这两种形式不可溶。因此,在AD患者的脑中,Aβ由三种形式:可溶性的单体、寡聚体和不可溶纤维。目前大多数学者认为Aβ的神经毒性主要由其寡聚体Oligomers形式表现。建议最好用PBS,RIPA对有些指标的检测是有影响的,尽量避免使用。不建议使用商品化的裂解试剂。不同的产品组成有差异且裂解能力也不同,如果试剂含有SDS等表面活性剂会对目的蛋白的天然构象造成影响,可能会出现测值明显降低或者假阴性。此外,由于是新引入的溶剂,不确定基质干扰的情况,可能会造成本底升高,从而影响测值准确性。生物样品中的TGF-β1通常以无活性的形式存在,在检测TGF-β1活性前必须进行活化处理。检测血清血浆,细胞上清等分泌型样本,需要进行活化处理。检测组织匀浆上清等胞内样本,可不进行活化。可以使用,但是细胞培养是需要无菌环境的,ELISA不需要无菌,我们建议客户尽量不要用这个仪器,避免做其他实验如细胞培养时造成污染,可以选择常规的烘箱。根据其底部的不同,又分为平底的,U型底、V型底等。平底的折射率低,适于在酶标仪检测;根据颜色可分为透明、黑色、白色。透明的是常用的,用于最一般的酶联免疫实验。E-EL-E605 SARS-CoV-2 Spike Protein S1 RBD ELISA Kit,免疫原序列(AA:319-541 Accession :P0DTC2),我们试剂盒识别的是S1 RBD蛋白,与客户的重组蛋白S1 415-636序列有一部分是不重合的,并且由于重组蛋白存在空间构象的差异性,客户的蛋白不确定会识别的到。我们内部没有验证过人头发样本,所以建议先做预实验。参考文献处理方法:ELISA法测定毛发皮质醇。提取过程包括在甲醇和丙酮中连续孵育,重复两次不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样,可以将组织样本制成10%组织匀浆上清,然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度,再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度,来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度(pg/mg prot或者ng/mg prot)。裂解MCM7细胞时,客户可以直接用预冷0.01 M PBS和胰蛋白酶按说明书处理即可,但要注意保证细胞生长状态并保证细胞数量达到10^6。由于叠氮化钠水溶液可以使蛋白质变性,影响HRP活性,对整体检测有干扰,不适合ELISA方法。不建议加叠氮化钠,但客户在尿液收集过程中要注意避免污染。E-EL-0009 FA/VB9是通用型ELISA检测试剂盒,可以检测人、大鼠和小鼠的生物相关液体中叶酸含量。我们内部没有验证过饲料中的叶酸,但目前饲料中叶酸的含量检测还是微生物检测方法居多。E-UNEL-H0163无包被人白细胞介素27(IL-27)酶联免疫吸附测定试剂盒,可检测p28和EBI3亚基。抗原用包被液稀释,一抗用通用型样本稀释液或者即用型生物素化抗体稀释液,二抗用即用型HRP酶结合物稀释液体。大小鼠是没有IL-8的。有些厂家会用把CXCL15作为IL-8的替代指标(转录水平验证),但我们比对过人的IL-8和鼠的CXCL15序列,同源性比较低,此外,目前还没有查到相关文献提出在蛋白水平上将CXCL15作为IL-8的替代指标的定论,所以不建议替代检测。皮质酮和皮质醇都是糖皮质激素,其中大小鼠和鸟禽类是检测皮质酮,其余常规种属检测皮质醇。血液中的睾酮可以分为游离状态的睾酮和结合状态的睾酮,游离睾酮指的是以游离的形式存在于血液中的睾酮,游离的睾酮属于活性状态。分泌的睾酮进入血液后,只有2%以游离形式存在,65%的睾酮与性激素结合蛋白结合,33%的睾酮与白蛋白结合。结合态的睾酮是暂时的储存形式,两者处于动态平衡,共同维持游离睾酮的血浆浓度。 血浆中的睾酮在前列腺等组织器官中的5α-还原酶作用下,转变为更强的双氢睾酮(DHT)。本司雌二醇试剂盒检测的是17β-雌二醇。 17α-雌二醇和17β-雌二醇,是雌二醇的两种异构体。17α-雌二醇是一种较弱的内源性甾体雌激素,相对其C17上的差向异构体17β-雌二醇(通常简称为雌二醇)仅在体内占少量。17α-雌二醇的雌激素效价强度只有17β-雌二醇的百分之一,且更亲和雌激素受体中的ERα而非ERβ。白蛋白由肝实质细胞合成,在血浆中的半寿期约为15-19天,是血浆中含量最多的蛋白质,占血浆总蛋白的40%-60%。 人体正常情况下,会有极少量白蛋白从肾小球基底膜中过滤到尿液中,称之为微量白蛋白。尿微量白蛋白是指在尿中出现微量白蛋白。任何能够引起肾小球基底膜通透性增高的病变,均可导致白蛋白的排出。尿微量白蛋白排出增加是疾病早期的改变,对疾病的早期诊断,早期治疗有重要的参考价值和临床意义。大量的临床研究表明尿微量白蛋白是预测糖尿病、高血压、心血管疾病血管损伤的敏感指标。维生素D是一种脂溶性维生素,有五种化合物,对健康关系较密切的是维生素D2和维生素D3。25-HVD3和DHVD3是维生素D在体内的两种主要存在形式。 维生素D在肝脏中通过羟基化作用转化成25-羟基维生素D(25-OH-VD),然后在肾脏中转换为具有活性的1,25-二羟基维生素D。 血清25-OH-VD的高低可以反映人体维生素D的储存水平,并且与维生素D缺乏的临床症状是相关的。维生素D活性形式主要为1,25-二羟维生素D3(DHVD3),它通过与维生素D受体(VDR)结合而发挥生理作用。维生素A是脂溶性的醇类物质,有多种分子形式。 其中VA1主要存在于动物肝脏、血液和眼球的视网膜中,又叫视黄醇,分子式C20H30O,VA2主要在淡水鱼中存在,分子式C20H28O。由于维生素A2的活性比较低,所以通常所说的维生素A是指维生素A1。我们的试剂盒检测的是维生素A1。补体系统作为天然免疫中的一类重要和保守的体系,当病原微生物或炎症介质存在时,可被激活最终通过末端成分组装成C5b-9膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC),为机体提供了快速和高效的清除入侵微生物的途径。MAC是一种多效免疫因子,在补体大量活化后,可插入细胞膜导致细胞溶破死亡,而近年来通过对MAC与有核细胞相互作用的研究,这一观点已发生改变。业已发现,有核细胞能通过囊泡化或内吞作用,清除沉积于细胞膜上的MAC,保护自身免遭补体溶破,此时的MAC称为亚溶解型( sublytic ),即sC5b-9。IgA有血清型和分泌型。血清型多为单体型,主要存在于血清中,占血清免疫球蛋白总量的10%-15%。分泌性IgA (slgA)是二聚体,通过J链连接,通过粘膜上皮细胞分泌到外分泌液中。它主要存在于胃肠道和支气管分泌物、初乳、唾液和眼泪中。VEGF是一个生长因子亚家族,是半胱氨酸结生长因子的血小板衍生生长因子家族。它们是重要的信号蛋白,参与血管生成(胚胎循环系统从头开始形成)和血管生成(血管从现有的血管系统中生长)。 VEGF家族包括五个成员:VEGF-A, VEGF-B,VEGF-C,VEGF-D,和胎盘生长因子(PGF)。VEGF是这五种亚型的总和。后面的四种是在VEGF-A之后被发现的,在它们被发现之前,VEGF-A被称为VEGF。所以一般VEGF检测的多为VEGF-A。 目前市场上没有可以检测所有亚型的ELISA试剂盒,虽然检测指标可能写的是VEGF,但一般都是检测VEGF-A这种亚型的。我们的试剂盒检测的全段甲状旁腺素。 PTH在血循环中主要有四种存在形式,一是完整的PTH1~84,占5%-20%,具有生物活性;二是N端 PTH1~34(即PTH-N),量很少;三是C端PTH56~84(即PTH-C,其中又可分为若干种不同长度的片段);四是中段PTH(即PTH-M)。后两者占PTH的75%-95%,半衰期长,但无生物活性。前二者半衰期短,不超过10min。此外还有少量的PTH原,前PTH原等。ICAM-1是分子量为76-114KD的跨膜蛋白,主要定位在细胞膜上。很多膜蛋白在正常情况下不存在于可溶性组分中,而在一些生理状态像炎症和自身免疫性疾病调控下,在血清、血浆、细胞上清等可溶性组分中sICAM-1存在并且浓度升高,可以检测,所以我们加上了可溶性的前缀,但是试剂盒中的标准品以及抗体识别的就是ICAM-1本身,可溶性只是代表这个试剂盒主要检测的是血清、血浆、细胞上清等可溶性天然组分。该试剂盒是专为全长人MYC(Uniprot编号:P01106),而不是MYC标签(EQKLISEEDL)。 此外,该试剂盒使用三明治- elisa原理,因此抗原必须具有两个或两个以上的抗原决定因子才能被试剂盒检测到。因此,理论上该试剂盒不能用于检测MYC-tag。机体中T3、T4绝大部分都是与甲状腺结合球蛋白、甲状腺结合前白蛋白和白蛋白结合,仅有较少部分以游离状态存在,即fT3、fT4,一般结合状态下的甲状腺素是不能发挥其生理功能的,只有游离状态的才能进入靶细胞与其受体结合并发挥生理功能,所以在一些疾病模型中,游离型的表达量会升高,客户可以检测游离型浓度变化来判断甲状腺功能情况,同时也建议查阅相关文献确认具体指标情况。血清里面也会有血红蛋白,由于红细胞的破裂和衰老代谢,血清中是会有一定浓度的血红蛋白存在的。8-OHdG这种物质在细胞内是与DNA片段结合在一起的,如果要测组织匀浆或者细胞提取液,需要将DNA提取出来,不过DNA抽提试剂盒的使用会引入一些外来试剂,对实验体系造成干扰,最后影响结果的准确度。所以我们是推荐检测血清血浆,尿液,细胞上清液等分泌型样本的。各种样本类型的基质是不一样的,为了降低基质本身的影响并提高常规样本测值的准确性,通常会设定不同体系的ELISA试剂盒,并以不同的货号展示。另外,有些指标在不同样本间浓度差异很大,所以通过不同的产品来满足客户对于操作便捷性的需求。肾素也被称为血管紧张素原酶,是一种由肾脏分泌的天门氨酸蛋白酶蛋白和酶,参与人体的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)——也被称为肾素-血管紧张素-醛固酮轴——调节细胞外液(血浆、淋巴)的体积,并调节人体的平均动脉血压。肾素也可以被称为激素,因为它有一个受体,(原)肾素受体,也被称为肾素受体和原肾素受体,以及酶活性,它可以将血管紧张素原水解成血管紧张素1。生物化学与生理学结构肾素前体的初级结构由406个氨基酸组成,前段和前段分别携带20个和46个氨基酸。成熟肾素含有340个氨基酸,质量为37 kDa 。 血管紧张素I通过血管紧张素转换酶(ACE)去除两个c末端残基转化为血管紧张素II (All)。主要通过肺内的ACE(但也存在于内皮细胞、肾上皮细胞和脑内)。 血管紧张素II被位于红细胞和大多数组织的血管床中的血管紧张素酶降解为血管紧张素III。它在循环中的半衰期约为30秒,而在组织中,它的半衰期可能长达15-30分钟。试剂盒中的抗体识别的是活化TGF-β,标准品也是活化结构,组织样本不需要额外活化处理。 (TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量的12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-β cDNA序列研究表明,单体的TGF-β的112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体份子(per-pro-TGF-β)从羧基端裂解而来。per-pro-TGF-β N端含有一个信号肽,在分泌前被裂解掉,成为非活性状态的多肽链前体(pro-TGF-β),通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基,所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-β。 机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-β。在体外,非活性状态的TGF-β又称为latency associated peptide(LAP),通过酸化可被活化。在体内,酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口,蛋白本身的裂解作用可使TGF-β复合体变为活化TGF-β。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的TGF-β,如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞等。) (此外,细胞培养基中的动物血清可能含有高浓度的潜隐 TGF-β1。为了获得最好的实验结果, 在 TGF-β1 测定试验中使用不含动物血清的细胞培养基。如果使用了含有动物血清的细胞培养基,应该设立适当的对照,确定 TGF-β1 的基准浓度。)我们说明书中并未指出检测活性或是非活性的,凝血因子F7,F9,F10这几款试剂盒检测的是总的,包括活性部分和非活性的形式。而凝血酶原是凝血因子的前体形式,可以看成是非活性的。该指标一般检测组织和细胞的比较多,血清血浆中也能检测到,但含量比较低。部分文献报道,是通过泛素连接酶复合物降解之后,成为游离形态释放到血液中的。与检测的样本类型有关。如果检测的是标记完成后生物素残留,那检测的就是游离的生物素;如果检测的是生物样本,那检测到的是结合型及游离型的生物素。该试剂盒对动物和植物均适用。 若您购买的生物素是含有咪唑酮环(反应集团,与亲和素反应)和噻吩环(生物素基)的,可以检测,但是检测的准确性不能保证。 活化生物素从有机相进入溶液相,是会水解的,活化生物素会从侧链的某一部分断开,分为两个部分,一部分是带有生物素基和咪唑酮环,一部分就是侧链或者彻底分解。带有生物素基和咪唑酮环这部分会结合到蛋白上。这时溶液相中的生物素分为两个部分,一部分是游离的,一部分是结合型的。从而导致结果不准确。人Ⅲ型前胶原(PCⅢ)试剂盒测整个前体,E-EL-H0183 人Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)酶联免疫吸附测定试剂盒 测N端的剪切体。根据参考文献,pro-C3检测的也是PⅢNP,但是是特异性检测COL3形成过程中产生的PⅢNP。但我们的PIIINP试剂盒不具备这种检测特异性。这两款试剂盒均不满足您的检测需求。 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3633973/ https://www.sci-hub.yt/https://doi.org/10.1111/apt.12820这两个指标检测总蛋白含量; 哺乳动物中,APP基因位于21号染色体,共有8个亚型,其亚型一般含有365~770个氨基酸残基。最常见的是APP695、APP751和APP770,其中APP695在中枢神经中高度表达。APP属I型跨膜糖蛋白,分子量约110~130 kDa,具有较大的膜外(氨基端)结构域和较小的胞质尾区(胞内羧基端)。APP主要通过淀粉样(β途径)和非淀粉样(α途径)2种途径进行代谢。淀粉样途径即APP被β分泌酶切割成为sAPPβ和1个含有99个氨基酸的C端片段;后者进一步被γ分泌酶切割成为Aβ和ACID,这种途径生成的Aβ占Aβ总量的90%~95%,包括Aβ1-40和Aβ1-42 2种类型,其中Aβ1-40的含量较高,但Aβ1-42具有强疏水作用,其毒性较大,而且易于聚合。这些Aβ碎片会在线粒体、溶酶体以及内质网中积累,从而导致这些亚细胞器功能失调。在基于α分泌酶的非淀粉质源途径中,α分泌酶将APP切割为sAPP和1个含有83个氨基酸的C端片段,然后被γ分泌酶切割产生P3和ACID,但这些小的片段会被神经元清除掉。 APP基因突变可引起蛋白表达异常或水解改变,从而影响Aβ在细胞中的含量和组成变化。Aβ在脑内主要以Aβ40和Aβ42 2种形式存在,其中Aβ42含量虽低(<10%),但易于聚合,进而纤维化而沉积,从而形成弥散性老年斑(senile plaque),这也是AD的主要病理特征之一。而且,APP在细胞膜上经β-和γ-分泌酶切割后产生的Aβ可以引起氧化应激、钙离子内流,进而损伤线粒体,导致神经细胞障碍,激活凋亡相关蛋白和因子,最终启动细胞的凋亡程序。另外,Aβ还可以通过引起脑内炎症反应和神经纤维缠结间接导致神经元凋亡,是AD形成和发展的重要原因。大多数物质在冷冻条件下可以相对稳定,但建议使用新采集的样品进行检测,以获得更准确的结果。归纳起来PAF检测有三大类方法:①生物学检测法;②理化法;③免疫学方法。ELISA检测建议在血浆样品中加入1mM TPCK或TLCK,以抑制PAF-AH的活性。ALP是碱性磷酸酶,是一类酶。根据来源的部位不一样,主要有三种,BALP是其中一种,来自于组织(肝/骨/肾)。还有两种,分别来自于胎盘和小肠。 E-EL-R0113是专门测组织的这种,E-BC-K091-M测的是总的碱性磷酸酶。这两种属于不同类型的前列腺素。 前列腺素E2 (PGE2)是最丰富的前列腺素,是由前列腺素E合成酶作用于前列腺素H2(前列腺素H2, PGH2)产生的。 前列腺素D2(PGD2)是另外一种前列腺素,由造血和脂蛋白前列腺素D合成酶(hPGDS和lPGDS) 作用于前列腺素H2(前列腺素H2, PGH2)产生的。 除此之外,这两者的受体以及研究领域不同 PGE2:主要研究胃肠道平滑肌 PGD2:主要研究过敏性疾病如哮喘可以检测细胞样本,您可以参考其他指标的细胞样本处理方法; 理论上神经元细胞用胰酶消化也是可以的;0.1M盐酸不适用于裂解细胞,首先这个浓度的盐酸应该只能使细胞的通透性改变,无法裂解细胞,其次强酸的引入,会导致蛋白的变性,从而影响抗原抗体的结合,以及改变ELISA实验体系的pH值,最终影响实验结果。血小板具有特定的形态结构和生化组成,在正常血液中有较恒定的数量,在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理过程中有重要作用。血小板只存在于哺乳动物血液中。我们这边检测正常大鼠血清血浆的血小板素时没有空腹要求。结合文献中的情况,一般是给药24h后检测大鼠血清血浆的血小板生成素,未提到大鼠要禁食的要求。建议您可以根据实验目的和文献进行参考选择。含酚红的培养基可能对睾酮检测有影响。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。 实际上具体选择上,如果您的实验涉及到激素和诱导的话,建议选用无酚红培养基,如果只是一般的细胞培养,还是建议使用含酚红培养基,因为PH的确定,在没酚红的条件下,不是一般的麻烦。 酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,但尽量不用,因为对培养的细胞有毒。介绍一个小窍门:培养基在分装时,留一管加酚红,放到培养箱内平衡(可以看出PH值的变化,又可以看培养基是否污染)。在培养前放到培养箱内平衡再使用(可以避免培养时使用酚红)。ApoE基因模型认为ApoE的合成是由位于一个基因位点上的三个等位基因所控制,即E2、E3和E4,每一个等位基因对应于一个主要异构体产生三种纯合子(E2/2,E3/3,E4/4)和三种杂合子(E2/3,E2/4,E3/4)共六种常见表型。ApoE 3/4为基因水平,ELISA试剂盒检测的是蛋白水平的APOE的含量,无法反应出基因层面的APOE3/4的表达。PGI2极不稳定,在pH为7.48的水溶液中,半衰期只有14. 5 min。在中性介质中,它也能水解成6-酮PGFla。 试剂盒设计是PGI2,但因为PGI2在生物体液样本中相对不稳定,因此我们设计的抗体对其代谢产物6-酮PGFla也具有交叉反应,目的在于通过检测6-酮PGFla和PGI2的含量反应总的PGI2量。您好,附件中是我这边查到的部分脂联素在正常血清血浆的参考值,大部分都是在十几ug-几十ug/ml之间的。我们这边整理这些内容主要是想客户这边了解到其实脂联素本身不是一个具有临床临界值(cut-off)的指标,它的研究测值其实使用不同的检测手法都会有很大的差异,尤其是科研用试剂盒,目前国际上没有一个国际标准品去校准不同生产厂家间的测值,但这不代表测值高或低就是错的。这也是为什么文献报道中,有的正常脂联素水平才几ug/ml,有的文献正常的都能到100ug/ml以上了,甚至可能都是高引用率的文章,这并不以某一篇文章作为参考对照。当然如果说是ug级和ng级之间这种差异就是比较明显的了,这种结果如果客户说异常,我们可以接受,但其实ng/mL的文献我刚刚在查阅时候都有看到一些。所以从科研角度讲,文献之间差异10倍左右,其实都是可能存在的。Cytochrome-C:最丰富、最稳定的细胞色素;参与能量转移; Cytochrome P450 aromatase :一种细胞色素P450单加氧酶,催化C19雄激素、雄激素-4-烯-3,17-二酮(雄烯二酮)和睾酮分别转化为C18雌激素、雌酮和雌二醇。催化C19雄激素连续三次氧化;这两个检测的是不同的指标,其中E-EL-H0835检测的是Human CTXⅠ的 1196-1218aa;E-EL-H0960检测的是Human β-CTx的1207-1214aa;并且这两者功能不一样,其中CTXⅠ是Ⅰ型胶原的降解指示剂;而β-CTx是骨重吸收评价指标;sC5b-9试剂盒检测的是总的,包括激活与未激活形式。 MAC是存在于细胞上的,但是当多功能糖蛋白S蛋白(vitronectin)与C5b9的液相结合时,可形成一种不能附着在细胞上的复合体,即SC5b9。 SC5b-9是存在于血浆中的膜攻击复合物,在其浓度异常升高时,表现出细胞毒性,它与细胞骨架成分或膜蛋白发生作用产生对细胞的非致死性作用,其在某些疾病的病理过程中起重要作用。 这款试剂盒检测的是sC5b-9的浓度,一般用于研究sC5b-9指标相关的疾病模型中,可以呈现出组间浓度变化,但是不能代表细胞上MAC的形成过程。生物素是一个小分子,您标记的蛋白质分子量较大,由于空间位阻效应,被标记的生物素分子不一定能完全暴露出结合位点,从而导致检测到的生物素含量偏低。只要蛋白质分子上被标记的生物素分子能够暴露出来,我们的生物素定量试剂盒就可以检测到。IL-1β precursor是无活性形式(31 kDa),被酶切割为成熟的有活性IL-1β的分泌形式(17.5kDa)在活化的巨噬细胞中表达。E-EL-M0037c检测的是成熟的IL-1β。 白细胞介素(IL)-1细胞因子家族与免疫反应和炎症相关。它由以下11个不同的分子形式组成:细胞间IL-1α (IL-1F1)、细胞外IL-1β (IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra, IL-1F3),以及IL-18 (IL-1F4)、IL-33 (IL-1F11)、IL-36α(IL-1F6)、IL-36β(IL-1F8)、IL-36γ(IL-1F9)、IL-36Ra(IL-1F5)、IL-37 (IL-1F7)和IL-38 (L-1F10)。其中最重要的促炎细胞因子是IL-1β。它主要是由单核细胞和巨噬细胞产生的一种非活性物质31 kDa前体,白细胞介素-1β原(proIL-1β),在半胱氨酸蛋白酶IL -1转化酶(ICE)的作用下可生成一个17.5kDa成熟且具有生物活性的蛋白IL-1β。该试剂盒确实是针对IgE蛋白Fc片段进行结合的 但是目前我们的试剂盒只对天然人源样本进行过检测验证,重组蛋白IgE的Fc片段由于蛋白表达的技术和表达后复性过程的差异,可能导致其相对于标准品存在结构上的差异,从而影响试剂盒中抗体对其的有效识别,所以不建议用于检测这种类型的样本血清铁蛋白就是铁蛋白,只不过是单指分泌到血清中的铁蛋白,所以用铁蛋白的盒子测血清样本就是测的血清铁蛋白了我们ELISA产品的二抗(检抗)都是HRP,目前应该是没有能测红细胞裂解液的 对于少量血红蛋白可以考虑在第一次洗板步骤中增加1-2次洗涤次数来减少影响,但除了血红蛋白之外,红细胞在破碎的过程中释放出的内源性的HRP酶等物质也会对底物起到催化的作用,所以还是不建议客户用这类样本进行检测因为组织样本在处理的过程中会有内源或外源的蛋白酶导致提取的蛋白降解,所以在处理时需要加入蛋白酶抑制剂保证目标蛋白的完整性。 如果客户在样本处理的过程中能保持样本低温且操作迅速,不加入蛋白酶抑制剂影响不会很大,制完样本之后需要及时检测,或马上分装冻存至-20℃或-80℃常规试剂盒中定价3200的指标一般是相对来说市面上相对不太常见的指标,在原料筛选和工艺研发上会更加困难一些,开发成本偏高,所以定价会比常见指标要贵一点纯水不可以,超纯水/灭菌注射用水/哇哈哈/屈臣氏蒸馏水都可以,但请注意购买的瓶装水尽量现开现用,避免存在污染VCAM-1是一种跨膜蛋白,它可以被部分水解进入到血液中,进入到血液中的部分即可溶性VCAM-1(sVCAM-1) E-EL-H5587 Human VCAM-1试剂盒检测的是总的VCAM-1,包括膜蛋白和可溶性形式;而E-EL-H2166 Human sVCAM-1试剂盒则专门检测可溶性形式的sVCAM-1 如果您要检测细胞上清样本,那么建议您购买E-EL-H2166这个货号尿蛋白:尿内出现的蛋白即尿蛋白,24h内全部尿液中的蛋白质总量,蛋白质的种类不止白蛋白一种,还有血红蛋白其他蛋白等 而尿微量白蛋白是尿液中的微量白蛋白,是尿蛋白中的一种 因此两者不是同一个指标,除此之外,尿蛋白定量检测方法一般选择:凯氏定氮法、双缩脲法等,因此不建议推荐尿微量白蛋白sLOX-1是LOX-1的可溶型形式,也就是LOX-1包含sLOX-1的氨基酸序列。 我们的E-EL-H1635c 这个试剂盒所用的免疫原是sLOX-1,所以是可以用来测分泌样本(例如血清血浆)中的sLOX-1,也可以测组织和细胞裂解液等样本中的膜蛋白形式。1. 重组蛋白由于序列、空间构象等不同,有可能与试剂盒的包被抗体或者检测抗体不匹配,而出现检测不到的情况。 2. 另外,由于溶解重组蛋白的复溶溶剂的加入,引入了新的试剂,也可能对试剂盒的检测体系造成干扰。重组蛋白类型我们一般不建议检测,很有可能检测不出。 3. 我们的抗体针对的是HBsAg,没有确切的表位信息。免疫原是从人血浆中纯化的HBsAg。肺表面活性物质相关蛋白(Pulmonary surfactant-associated protein,SP)分为SP-A、SP-B、 SP-C和SP-D。SP-A是肺表面活性物质(Pulmonary Surfactant,PS)。SP-A基因包含有SP-A1 和SP-A2;SP-A多数来源于SP-A1的转录表达。mock更接近于negative control(NC)就是空白对照,啥都不加。 control是对照,比如加药,光加药物溶剂(DMSO)的叫control vector一般是人工构建的过表达或RNAi载体去转染细胞时,光转染空白质粒那一组叫vector,理论上,也是对照的一种,表明你转染的质粒本身对细胞的某个生理现象无影响。ELISA未包被试剂盒是不能出售单组分的(没有对应的单组分货号),不能出售,推荐客户购买整套试剂盒。ELISA推荐使用EDTA作为抗凝剂,尽量避免肝素作为抗凝剂(过量肝素可能造成检测结果偏高,若使用肝素抗凝剂,请确保肝素浓度低于10 IU /mL裂解MCM7细胞时,客户可以直接用预冷0.01 M PBS和胰蛋白酶按说明书处理即可,但要注意保证细胞生长状态并保证细胞数量达到10^6。我们查阅了相关文献,有报道称:血浆治疗中使用edta -抑肽蛋白导致胃饥饿素稳定性的下降低于其他治疗方法。请见附件。客户可以在EDTA-Na2抗凝管中加入抑肽蛋白,以抑制胃饥饿素的降解。 此外,我们用正常人血浆(不添加蛋白酶抑制剂)验证了E-EL-H1919,样品未稀释,参考值约为0.3-1.5 ng/mL。E-EL-H6025,该试剂盒中标准品是由E.coli重组表达的human GLP1 92-128 aa(# P01275),包被抗体和检测抗体的免疫原序列均为human GLP1 92-128 aa(# P01275)。 这个试剂盒检测的是total GLP-1,不包含proglucagon。 我们报出的GLP-1的氨基酸序列中包含信号肽的位置,客户从文献中得到的GLP-1序列去掉了信号肽。proglucagon 72–108 (GLP-1 1–37),和我们的human GLP1 92-128 aa(# P01275),本质上是相同的GLP-1 (1–37)。GLP-1在不同的组织中有不同的加工过程,成为不同的剪切体。标准品为大肠杆菌表达的重组人Zonulin 19-406 aa (#P00738)。捕获抗体和检测抗体均为小鼠单克隆,捕获抗体和检测抗体的免疫原为重组人Zonulin 19-406 aa,基于Uniprot中# P00738的序列。 该试剂盒E-EL-H5560设计用于检测zonulin, HP-2的前体,但不能检测成熟HP。Human Zonulin和Haptoglobin之间没有明显的交叉反应或干扰。请查收附件报告检测的是成熟有活性的胰岛素,前胰岛素原经过蛋白水解作用除其前肽,生成胰岛素原。胰岛素原随细胞浆中的微泡进入高尔基体,由86个氨基酸组成的长肽链--胰岛素原在高尔基体中经蛋白酶水解生成胰岛素及C肽,分泌到B细胞外,进入血液循环中。未经过蛋白酶水解的胰岛素原,一小部分随着胰岛素进入血液循环,胰岛素原的生物活性仅及胰岛素的5%。Angiotensin II (Ang II)是血管紧张素,是一种血管收缩剂,用于增加血压; Angiopoietin-2是促血管生成素,一种蛋白质,促进细胞死亡并破坏血管生成。然而,当它与血管内皮生长因子(VEGF)结合时,它可以促进新血管形成。钙卫蛋白(Calprotectin),钙卫蛋白也被称为S100A8/A9,主要来源于中性粒细胞和巨噬细胞,是一种含钙的蛋白质,分子量大约为36 kD,由两条分子量为14 kD的重链和一条分子量为8 kD的轻链组成,形成钙结合蛋白质异三聚体。钙卫蛋白广泛分布在人体细胞、组织以及体液中,特别是在粒细胞、单核细胞和角质细胞中含量较高; S100A9是钙结合蛋白S100家族的重要成员之一,其功能作用广泛,参与多种生物学过程,是急慢性炎症中重要的促炎介质我们检测的是总的F8,序列是aa1892-2040(#P00451),无论B区是否缺失我们都可以检测到。脑内神经递质分为四类,即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质,它不以胞吐的方式释放,而是凭借其溶脂性穿过细胞膜,通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。E-EL-H6075检测总MMP9,可识别前体MMP-9、活性MMP-9和TIMP&MMP-9复合体。TnI和TnT的心肌亚型(cTnI和cTnT)与骨骼肌中对应的蛋白来自不同的基因,具有独特的抗原表位,心肌特异度极高,在心梗诊断方面,cTnI与cTnT拥有较好的一致性。但cTnI的劣势是易发生蛋白质水解和酶代谢,降解在体内体外都可发生,有多种存在形式:自由的和复合形式、蛋白结合形式、复合的非肝磷脂形式、磷酰基形式;而Troponin T单体是TnT唯一的存在形式。E-EL-H6027 Human C4(Complement Component 4) ELISA Kit 检测的是总的C4。E-EL-H0216可识别IL-32所有的异构体。His-tag 是带组氨酸标签的蛋白,组氨酸与组胺是有区别的,组胺是由组氨酸在脱羧酶的作用下产生的。我们的试剂盒是检测组胺的,不识别His-tag。IL-27是异源二聚体,由EBI3和p28组成,我们的试剂盒检测的是异二聚体形式的IL-27,无法识别EBI3单体。我们的试剂盒识别的是IL-15 aa49-162(#P40933)。 ALT-803是IL-15突变体(IL-15N72D)和IL-15RαSu/Fc的二聚体蛋白。 IL-15和ALT-803的在序列、结构上有差异,试剂盒抗体可能识别不到ALT-803,不建议用IL-15的试剂盒检测ALT-803。E-EL-M2419中包被抗体和检测抗体的免疫原均为重组小鼠降钙素原aa26-136(#P70160)。内部测试结果显示本试剂盒与小鼠降钙素之间没有交叉反应。E-EL-M0217可检测降钙素。心肌细胞受刺激后(心室机械性牵张、心肌缺氧、缺血等),产生含134个氨基酸的B型利钠肽原前体(pre-proBNP), 随后形成含108个氨基酸的BNP前体(proBNP),后者在内切酶的作用下裂解为含有76个氨基酸的NT-proBNP和32个氨基酸的BNP 。BNP和NT-proBNP 都曾经作为心衰监测指标,但是二者正常值相差很多,NT-proBNP半衰期相对较长,代谢途径较BNP少,浓度较稳定,含量相对较高(比BNP约高16-20倍),检测相对较容易,是较理想的预测指标。答:①尽量使用没用溶血作用的麻醉剂 ②静脉采血时,回抽压力不宜过大 ③不宜使用真空管采血 ④所采全血不宜激烈震荡和离心转速过大 ⑤收集完血清应尽快完成检测,当溶血对检测有较大影响时,应尽量避免低温冻融。靶标均为CRP,HS-CRP是高敏CRP,根据试剂盒灵敏度的差异界定高敏还是普通的CRP检测产品。TRAP是酸性磷酸酶6 种同工酶(0-5 型) 中一种, 即第5 型。TRAP主要存在于巨噬细胞、破骨细胞、Gaucher 细胞、红细胞、血小板、脾脏毛状细胞以及单核吞噬细胞中, 在正常人血清中, TRAP 以两种不同的糖基化形式存在, 即TRAP - 5a 和TRAP- 5b , 其中TRAP - 5a 主要来源于炎性巨噬细胞, 而TRAP - 5b 则主要来源于破骨细胞。 TRAP-5a 可以在唾液酸酶作用下转变为TRAP - 5b。纯化的人破骨细胞的TRAP 是TRAP - 5b , 不含唾液酸残基, 而TRAP - 5a 含有唾液酸残基。触珠蛋白(HP)是一种具有免疫调节特性的血红蛋白结合蛋白。HP包含两种类型的多肽链:β链,这是三个表型共同的,和α1或α2链,形成HP11,HP22,HP21。 Zonulin是pre- haptoglobin-2 (pre-HP2)。在哺乳动物中,NF-κB 家族由五个相关的转录因子组成:P50、P52、p65(RelA)、c-Rel 及RelB。NFκb一般为p65和p50(p105为p50的前体)的异源二聚体,几乎存在于体内所有细胞且含量最高,活性最强;此外还存在p65和p105的二聚体Klotho是一种由人类KL基因编码的酶。Klotho有三个亚家族:α-klotho、β-klotho和γ-klotho。α-klotho激活FGF23, β-klotho激活FGF19和FGF21 ,当亚家族未明确时,“klotho”一词一般指a-klotho亚家族。 E-EL-H5451人可罗索(KL)酶联免疫吸附测定试剂盒,就是检测α-klotho。该试剂盒专为猴PCDH15设计,不会与人类样品发生交叉反应,但我们尚未验证其他灵长类动物的样品。 该试剂盒中的抗体识别PCDH15的细胞外区域。我们的试剂盒检测的是分泌类的活性IL-18,而一般情况下只有caspase-1剪切后的IL-18才具有活性,因此我们试剂盒检测的是剪切形式的IL-18。有研究表明会将酰基化饥饿素称为辛酰基化饥饿素,二者为同一种物质,可直接推荐E-EL-H2002 酰基化饥饿素(Acyl Ghrelin)即为辛酰基化。饥饿素是目前唯一被发现在生理状态下被脂肪酸修饰的内源多肽激素,其第三位丝氨酸可经酰基转移酶催化产生辛酰化修饰。不是,内皮素有很多亚型,ET-1,ET-2,ET-3和ET-4。ET-1是内皮细胞释放的主要亚型,也是含量最多的亚型。一般检测ET-1较多。不是同一个指标。 MAC-1是α(CD11b)与β(CD18)结合形成非共价异二聚体整合素αM/β2,也称为MAC-1和补体受体类型 3 (CR3)。整合素 alpha M/beta 2 在粒细胞、巨噬细胞、树突细胞和自然杀伤细胞上表达。激活后,αM/β2 可以结合多种配体(包括 ICAM-1、纤维蛋白原和 C3 补体片段 C3bi)以介导吞噬细胞粘附、迁移和摄取补体调理颗粒。 而MCSF,也称为 CSF-1,是一种四α螺旋束细胞因子,是巨噬细胞存活、增殖和分化的主要调节因子。PDGF家族由四种不同基因编码的四种不同多肽链组成(即PDGF-A,PDGF-B,PDGF-C,PDGF-D)。4个PDGF链通过同质或异质二聚体组装成5种不同的异构体(PDGF-AA,PDGF-AB,PDGF-BB, PDGF-CC和PDGF-DD)。值得注意的是,没有涉及PDGF-C和PDGF-D链的异源二聚体被描述。 可以认为是PDGF-B是其中的一条多肽链,而PDGF-BB是PDGF家族的一种同质二聚体异构体。不需要。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术,把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中,仅由单一溶液组成,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。加入终止液后,一方面,破坏了 HRP酶的活性,使酶的催化功能丧失;另一方面, 由于pH改变而使得最终的颜色发生变化。蛋白定量没有具体要求,选做是的不能的,需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。暂无详细参考,请查阅文献资料看看可以麻醉,要求不能溶血后续给药造模处理的时候,培养基的用量可以减少一些。暂无参考,抱歉。包被在酶标板上的是小鼠IgG特异的单克隆捕获抗体,当加入样品时,其中的小鼠IgG会与捕获抗体结合,培养液中的血清来源种属不同,不会影响。8孔×12条,可以拆卸使用,不用的酶标板条装在铝箔袋中。标准品是放置于试剂瓶,然后做冻干处理,老师可以先用10000×g离心1min,然后直接观察下试剂瓶的底部或者侧壁。目前我们的冻干粉是浓度单位暂时没有活力单位的信息。一般影响不大。可以。若待测样品不能及时检测,样品制备后请分装,冻存于-20℃(3个月内)或-80℃(1个月内)尽快检测,并注意避免反复冻融。检测具有活性的TGF-β二聚体暂时没有相关数据提供,建议老师检测时候多做几个浓度梯度进行测试,确保检测的值落在标曲范围内即可。IL-1β precursor是无活性形式(31 kDa),被酶切割为成熟的有活性IL-1β的分泌形式(17 kDa)。E-EL-M0037检测的是成熟的IL-1β。该试剂盒是为新冠病毒的原始菌株设计的,奥密克戎变异株尚未得到验证。然而,我们已经通过试剂盒验证了26个重组SARS-CoV-2刺突蛋白变体。有关更多信息,客户可以参考套件说明(https://file.elabscience.com/Manual/covid_19/E-EL-E605 .pdf)。