F-TESTO(Free Testosterone) ELISA Kit
中文名称:游离睾酮(F-TESTO)酶联免疫吸附测定试剂盒

Price:
- 反应性: Universal
- 检测范围: 31.25-2000 pg/mL
- 灵敏度: 18.75 pg/mL
产品应用 | ELISA |
检测原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用F-TESTO抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的F-TESTO与包被的F-TESTO竞争生物素标记的抗F-TESTO单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,F-TESTO浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中F-TESTO的浓度。 |
反应类型 | Competitive-ELISA |
规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
反应时间 | 2 h 30 min |
反应性 | Universal |
检测方法 | 比色法;ELISA;竞争法 |
检测范围 | 31.25-2000 pg/mL |
灵敏度 | 18.75 pg/mL |
样本体积 | 50 μL |
样本类型 | 血清、血浆 |
特异性 | 可检测样本中的F-TESTO,且与其它类似物无明显交叉反应 |
精密度 | 板内,板间变异系数均<10% |
回收率 | 80%-120% |
储存条件 | 2-8℃ |
有效期 | 12个月 |
数据处理 |
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Q1:睾酮,游离睾酮,双氢睾酮之间的关系?
血液中的睾酮可以分为游离状态的睾酮和结合状态的睾酮,游离睾酮指的是以游离的形式存在于血液中的睾酮,游离的睾酮属于活性状态。分泌的睾酮进入血液后,只有2%以游离形式存在,65%的睾酮与性激素结合蛋白结合,33%的睾酮与白蛋白结合。结合态的睾酮是暂时的储存形式,两者处于动态平衡,共同维持游离睾酮的血浆浓度。 血浆中的睾酮在前列腺等组织器官中的5α-还原酶作用下,转变为更强的双氢睾酮(DHT)。
Q2:我想测细胞培养上清里睾酮的含量,含酚红培养基会对睾酮检测有影响么?
含酚红的培养基可能对睾酮检测有影响。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应及对细胞的毒性作用,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。
介绍一个小窍门:培养基在分装时,留一管加酚红,放到培养箱内平衡(可以看出PH值的变化,又可以看培养基是否污染)。在培养前放到培养箱内平衡再使用(可以避免培养时使用酚红)。
Q3:我想测细胞培养上清里睾酮的含量,含酚红培养基会对睾酮检测有影响么?
含酚红的培养基可能对睾酮检测有影响。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。 实际上具体选择上,如果您的实验涉及到激素和诱导的话,建议选用无酚红培养基,如果只是一般的细胞培养,还是建议使用含酚红培养基,因为PH的确定,在没酚红的条件下,不是一般的麻烦。 酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,但尽量不用,因为对培养的细胞有毒。介绍一个小窍门:培养基在分装时,留一管加酚红,放到培养箱内平衡(可以看出PH值的变化,又可以看培养基是否污染)。在培养前放到培养箱内平衡再使用(可以避免培养时使用酚红)。
Q4:请问血清样品稀释可以用DD水吗
不能的,需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。
Q5:细胞裂解液需要先BCA定量后再做ELISA吗
蛋白定量没有具体要求,选做
Q6:神经递质的试剂盒有吗?大鼠的 咱们有推荐的吗?
脑内神经递质分为四类,即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质,它不以胞吐的方式释放,而是凭借其溶脂性穿过细胞膜,通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。
Q7:检测组织匀浆上清时,是否需要将组织匀浆上清稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样?
不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样,可以将组织样本制成10%组织匀浆上清,然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度,再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度,来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度(pg/mg prot或者ng/mg prot)。
Q8:有可以测植物或者是微生物样本ELISA试剂盒吗?
目前我们的ELISA试剂盒仅适用于动物样本,没有用于检测植物/微生物样本的试剂盒
Q9:我需要测毛发里面的皮质酮和睾酮,有没有一些样本提取的步骤呢?
头发样本制备方法:
头发样本用甲醇清洗,在每个样品中加入5 mL高效液相色谱(HPLC)级甲醇,旋转3分钟,然后倒入多余的甲醇,将头发洗两次。洗发后,将头发样本放在铝箔上,在防护帽中干燥3天。称量干燥的头发样本,并转移到含有不锈钢研磨珠的2ml聚丙烯管中。将含有头发和磨珠的试管放入搅珠器中,每个样品研磨2分钟以产生粉末。研磨后,在装有头发粉的试管中加入1.5 mL甲醇,样品缓慢旋转孵育24小时以提取类固醇。10000 g离心4 min,将0.6 mL含类固醇的甲醇上清转移到新的1.5 mL微离心管中。样品在防护罩中干燥2-3天以蒸发甲醇。蒸干提取物用0.4 mL试剂盒中的稀释液稀释后检测
Q10:我的样本体积不过,可以少加一些,然后其他试剂等比例减少吗?
不可以,我们试剂盒的检测体系要严格按照要求上样量加样才能保证准确检测
如果样本体积不够可以考虑适当稀释,但需要先进行预实验确认稀释倍数是否合适