Human Aβ1-42(Amyloid Beta 1-42) ELISA Kit
中文名称：人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)酶联免疫吸附测定试剂盒
Price:
- 反应性： Human
- 检测范围： 15.63-1000 pg/mL
- 灵敏度： 9.38 pg/mL
| 产品应用 | ELISA |
| 检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Aβ1-42抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人Aβ1-42会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗人Aβ1-42抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人Aβ1-42抗体与结合在包被抗体上的人Aβ1-42结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，Aβ1-42浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中Aβ1-42的浓度。 |
| 反应类型 | Sandwich-ELISA |
| 规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
| 反应时间 | 3 h 30 min |
| 反应性 | Human |
| 检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
| 检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
| 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 样本体积 | 100 μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他生物体液 |
| 特异性 | 可检测样本中的人Aβ1-42，且与其它类似物无明显交叉反应 |
| 精密度 | 板内，板间变异系数均<10% |
| 回收率 | 80%-120% |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 有效期 | 12个月 |
| 数据处理 |
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Q1:(Aβ1-40) 和(Aβ1-42)有什么区别？
哺乳动物中，APP基因位于21号染色体，共有8个亚型，其亚型一般含有365~770个氨基酸残基。最常见的是APP695、APP751和APP770，其中APP695在中枢神经中高度表达。APP属I型跨膜糖蛋白，分子量约110~130 kDa，具有较大的膜外(氨基端)结构域和较小的胞质尾区(胞内羧基端)。APP主要通过淀粉样(β途径)和非淀粉样(α途径)2种途径进行代谢。淀粉样途径即APP被β分泌酶切割成为sAPPβ和1个含有99个氨基酸的C端片段；后者进一步被γ分泌酶切割成为Aβ和ACID，这种途径生成的Aβ占Aβ总量的90%~95%，包括Aβ1-40和Aβ1-42 2种类型，其中Aβ1-40的含量较高，但Aβ1-42具有强疏水作用，其毒性较大，而且易于聚合。这些Aβ碎片会在线粒体、溶酶体以及内质网中积累，从而导致这些亚细胞器功能失调。在基于α分泌酶的非淀粉质源途径中，α分泌酶将APP切割为sAPP和1个含有83个氨基酸的C端片段，然后被γ分泌酶切割产生P3和ACID，但这些小的片段会被神经元清除掉。
APP基因突变可引起蛋白表达异常或水解改变，从而影响Aβ在细胞中的含量和组成变化。Aβ在脑内主要以Aβ40和Aβ42 2种形式存在，其中Aβ42含量虽低(<10%)，但易于聚合，进而纤维化而沉积，从而形成弥散性老年斑(senile plaque)，这也是AD的主要病理特征之一。而且，APP在细胞膜上经β-和γ-分泌酶切割后产生的Aβ可以引起氧化应激、钙离子内流，进而损伤线粒体，导致神经细胞障碍，激活凋亡相关蛋白和因子，最终启动细胞的凋亡程序。另外，Aβ还可以通过引起脑内炎症反应和神经纤维缠结间接导致神经元凋亡，是AD形成和发展的重要原因。
实验操作视频
