Human Zonulin ELISA Kit
中文名称：人连蛋白(Zonulin)酶联免疫吸附测定试剂盒
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- 反应性： Human
- 检测范围： 0.78-50 ng/mL
- 灵敏度： 0.47 ng/mL
| 产品应用 | ELISA |
| 检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Zonulin抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人Zonulin会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗人Zonulin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人Zonulin抗体与结合在包被抗体上的人Zonulin结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，Zonulin浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中Zonulin的浓度。 |
| 反应类型 | Sandwich-ELISA |
| 规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
| 反应时间 | 3 h 30 min |
| 反应性 | Human |
| 检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
| 检测范围 | 0.78-50 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.47 ng/mL |
| 样本体积 | 100 μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他生物体液 |
| 特异性 | 可检测样本中的人Zonulin，且与其它类似物无明显交叉反应 |
| 精密度 | 板内，板间变异系数均<10% |
| 回收率 | 80%-120% |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 有效期 | 12个月 |
| 数据处理 |
-
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Q1:我已经将你的zonulin检测用于临床试验，现在它的手稿即将发表(伟大的结果!!)。审稿人正在询问有关zonulin测定的细节。它是多克隆的还是单克隆的，你能详细说明这种蛋白质是否确实是“zonulin”还是另一种类似的蛋白质？如果你能帮忙，谢谢
标准品为大肠杆菌表达的重组人Zonulin 19-406 aa (#P00738)。捕获抗体和检测抗体均为小鼠单克隆，捕获抗体和检测抗体的免疫原为重组人Zonulin 19-406 aa，基于Uniprot中# P00738的序列。 该试剂盒E-EL-H5560设计用于检测zonulin, HP-2的前体，但不能检测成熟HP。Human Zonulin和Haptoglobin之间没有明显的交叉反应或干扰。请查收附件报告
Q2:HP与Zonulin区别是什么呢？
触珠蛋白(HP)是一种具有免疫调节特性的血红蛋白结合蛋白。HP包含两种类型的多肽链:β链，这是三个表型共同的，和α1或α2链，形成HP11，HP22，HP21。 Zonulin是pre- haptoglobin-2 (pre-HP2)。
Q3:请问血清样品稀释可以用DD水吗
不能的，需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。
Q4:说明书中的双蒸水可以用纯化水/超纯水/灭菌注射用水/哇哈哈/屈臣氏蒸馏水代替吗
纯水不可以，超纯水/灭菌注射用水/哇哈哈/屈臣氏蒸馏水都可以，但请注意购买的瓶装水尽量现开现用，避免存在污染
Q5:细胞裂解液需要先BCA定量后再做ELISA吗
蛋白定量没有具体要求，选做
Q6:神经递质的试剂盒有吗？大鼠的 咱们有推荐的吗？
脑内神经递质分为四类，即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质，它不以胞吐的方式释放，而是凭借其溶脂性穿过细胞膜，通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。
Q7:检测组织匀浆上清时，是否需要将组织匀浆上清稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样？
不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样，可以将组织样本制成10%组织匀浆上清，然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度，再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度，来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度（pg/mg prot或者ng/mg prot）。
Q8:有的指标试剂盒定价为3200，是因为抗体对更贵吗
常规试剂盒中定价3200的指标一般是相对来说市面上相对不太常见的指标，在原料筛选和工艺研发上会更加困难一些，开发成本偏高，所以定价会比常见指标要贵一点
Q9:有可以测植物或者是微生物样本ELISA试剂盒吗？
目前我们的ELISA试剂盒仅适用于动物样本，没有用于检测植物/微生物样本的试剂盒
Q10:我需要测毛发里面的皮质酮和睾酮，有没有一些样本提取的步骤呢？
头发样本制备方法：
头发样本用甲醇清洗，在每个样品中加入5 mL高效液相色谱(HPLC)级甲醇，旋转3分钟，然后倒入多余的甲醇，将头发洗两次。洗发后，将头发样本放在铝箔上，在防护帽中干燥3天。称量干燥的头发样本，并转移到含有不锈钢研磨珠的2ml聚丙烯管中。将含有头发和磨珠的试管放入搅珠器中，每个样品研磨2分钟以产生粉末。研磨后，在装有头发粉的试管中加入1.5 mL甲醇，样品缓慢旋转孵育24小时以提取类固醇。10000 g离心4 min，将0.6 mL含类固醇的甲醇上清转移到新的1.5 mL微离心管中。样品在防护罩中干燥2-3天以蒸发甲醇。蒸干提取物用0.4 mL试剂盒中的稀释液稀释后检测
实验操作视频
