Rat INS(Insulin) ELISA Kit
中文名称：大鼠胰岛素(INS)酶联免疫吸附测定试剂盒
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- 反应性： Rat
- 检测范围： 0.31-20 ng/mL
- 灵敏度： 0.19 ng/mL
| 产品应用 | ELISA |
| 检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠INS抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的大鼠INS会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗大鼠INS抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗大鼠INS抗体与结合在包被抗体上的大鼠INS结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，INS浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中INS的浓度。 |
| 反应类型 | Sandwich-ELISA |
| 规格 |
96 T
/ 48 T
/ 96 T × 5
|
| 反应时间 | 3 h 30 min |
| 反应性 | Rat |
| 检测方法 | 比色法;ELISA;夹心法 |
| 检测范围 | 0.31-20 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.19 ng/mL |
| 样本体积 | 100 μL |
| 样本类型 | 细胞培养上清、组织匀浆上清 |
| 特异性 | 可检测样本中的大鼠INS，且与其它类似物无明显交叉反应 |
| 精密度 | 板内，板间变异系数均<10% |
| 回收率 | 80%-120% |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 有效期 | 12个月 |
| 数据处理 |
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Q11:想咨询一下阴道分泌物样本应该如何处理呢？
拭子采集后用500ul PBS洗脱，5000×g 离心 10 分钟（如果样本仍有浑浊，可尝试 10000×g 离心），离心后取上清检测
Q12:您的ELISA试剂盒有没有二抗不是HRP的，因为我的样本是红细胞裂解液，HRP 会干扰Hb或者有没有能滤除hb的办法
我们ELISA产品的二抗(检抗)都是HRP，目前应该是没有能测红细胞裂解液的
对于少量血红蛋白可以考虑在第一次洗板步骤中增加1-2次洗涤次数来减少影响，但除了血红蛋白之外，红细胞在破碎的过程中释放出的内源性的HRP酶等物质也会对底物起到催化的作用，所以还是不建议客户用这类样本进行检测
Q13:如果客户的蛋白来源是仓鼠的，小鼠ELISA试剂盒可以检测吗？
目前没有验证过仓鼠样本在小鼠试剂盒中的检测情况，且不是一个种属，不建议推荐检测。
Q14:你好，请问ELISA检测的时候选哪个类型的板子呀？
根据其底部的不同，又分为平底的，U型底、V型底等。平底的折射率低，适于在酶标仪检测；根据颜色可分为透明、黑色、白色。透明的是常用的，用于最一般的酶联免疫实验。
Q15:TMB显色每孔加入200微升后，还需要过氧化氢的使用吗？我用的是链霉亲和素标记的HRP
不需要。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术，把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，并且使检测结果更加稳定可靠。
Q16:Elisa试剂盒处理组织的时候为什么要加入蛋白酶抑制剂呢？没有蛋白酶抑制剂会对检测影响很多吗？
因为组织样本在处理的过程中会有内源或外源的蛋白酶导致提取的蛋白降解，所以在处理时需要加入蛋白酶抑制剂保证目标蛋白的完整性。
如果客户在样本处理的过程中能保持样本低温且操作迅速，不加入蛋白酶抑制剂影响不会很大，制完样本之后需要及时检测，或马上分装冻存至-20℃或-80℃
Q17:ELISA试剂盒可以用在自动分析仪上吗
我们的ELISA试剂盒目前还没有验证过是否适配于自动分析仪，说明书中提供的检测步骤均为手动操作
如果客户有相应需求，可以自行进行验证
Q18:ELISA的孵育过程是否可以用细胞培养箱进行实验？
可以使用，但是细胞培养是需要无菌环境的，ELISA不需要无菌，我们建议客户尽量不要用这个仪器，避免做其他实验如细胞培养时造成污染，可以选择常规的烘箱。
Q19:ELISA实验中，孵育阶段可以使用摇床或是水浴锅进行孵育吗？
为了保证孵育阶段温度波动控制在1℃以内，推荐客户使用恒温箱进行孵育
如果确实因为条件限制无法使用恒温箱孵育，可以考虑使用水浴锅孵育，但需要注意避免酶标板被水浴用水污染
不建议使用摇床进行孵育，尤其是带转速的摇床
Q20:ELISA实验中加入终止液终止显色反应的原理是什么？
加入终止液后，一方面，破坏了 HRP酶的活性，使酶的催化功能丧失；另一方面， 由于pH改变而使得最终的颜色发生变化。
实验操作视频
