中文名称：转化生长因子β1(TGF-β1)酶联免疫吸附测定试剂盒

Q3:TGF-β1检测在活化样本的时候一定要按照说明书方法中说的体积进行活化吗？

活化步骤中使用的样本和试剂只要比例和说明书一致即可

Q4:TGF-β(转化生长因子-β）为什么需要活化，组织样本为何不需要活化处理？

试剂盒中的抗体识别的是活化TGF-β，标准品也是活化结构，组织样本不需要额外活化处理。 （TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量的12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-β cDNA序列研究表明，单体的TGF-β的112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体份子（per-pro-TGF-β)从羧基端裂解而来。per-pro-TGF-β N端含有一个信号肽，在分泌前被裂解掉，成为非活性状态的多肽链前体（pro-TGF-β)，通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基，所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-β。 机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-β。在体外，非活性状态的TGF-β又称为latency associated peptide（LAP），通过酸化可被活化。在体内，酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口，蛋白本身的裂解作用可使TGF-β复合体变为活化TGF-β。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的TGF-β，如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞等。） （此外，细胞培养基中的动物血清可能含有高浓度的潜隐 TGF-β1。为了获得最好的实验结果， 在 TGF-β1 测定试验中使用不含动物血清的细胞培养基。如果使用了含有动物血清的细胞培养基，应该设立适当的对照，确定 TGF-β1 的基准浓度。）

Q5:TGF-β(转化生长因子-β）为什么组织样本不需要活化处理？

由于试剂盒中的抗体识别的是活化TGF-β，而TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量的12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-β cDNA序列研究表明，单体的TGF-β的112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体份子（per-pro-TGF-β)从羧基端裂解而来。per-pro-TGF-β N端含有一个信号肽，在分泌前被裂解掉，成为非活性状态的多肽链前体（pro-TGF-β)，通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基，所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-β。
机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-β。在体外，非活性状态的TGF-β又称为latency associated peptide（LAP），通过酸化可被活化。在体内，酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口，蛋白本身的裂解作用可使TGF-β复合体变为活化TGF-β。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的活化的TGF-β，如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞等。因此，通常组织样本检测时不需要额外活化处理。

Q6:E-EL-0162 TGF-β1试剂盒需要对检测样本进行活化处理吗？活化与非活化分别检测的是什么形式呢？

生物样品中的TGF-β1通常以无活性的形式存在，在检测TGF-β1活性前必须进行活化处理。检测血清血浆，细胞上清等分泌型样本，需要进行活化处理。检测组织匀浆上清等胞内样本，可不进行活化。

Q7:请问血清样品稀释可以用DD水吗

不能的，需要使用试剂盒自带的标准品&样品稀释液。

Q8:细胞裂解液需要先BCA定量后再做ELISA吗

蛋白定量没有具体要求，选做

Q9:神经递质的试剂盒有吗？大鼠的 咱们有推荐的吗？

脑内神经递质分为四类，即生物原胺类、氨基酸类、肽类、其它类。 生物原胺类神经递质包括:多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、5-羟色胺(5-HT)也称(血清素)。 氨基酸类神经递质包括:γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、谷氨酸、组胺、乙酰胆碱(Ach)。 肽类神经递质分为:内源性阿片肽、P物质、神经加压素、胆囊收缩素(CCK)、生长抑素、血管加压素和缩宫素、神经肽y。其它神经递质分为:核苷酸类、花生酸碱、阿南德酰胺、sigma受体(σ受体)。其它类:一氧化氮就被普遍认为是神经递质，它不以胞吐的方式释放，而是凭借其溶脂性穿过细胞膜，通过化学反应发挥作用并灭活。在突触可塑性变化、长时程增强效应中起到逆行信使的作用。

Q10:检测组织匀浆上清时，是否需要将组织匀浆上清稀释到相同的浓度(ug/ul)再上样？

不需要稀释成统一的组织蛋白浓度再上样，可以将组织样本制成10%组织匀浆上清，然后再用BCA法检测组织蛋白的总浓度，再进行ELISA检测。用ELISA方法检测到的靶蛋白浓度除以组织匀浆上清的总蛋白浓度，来表示组织匀浆上清中目的蛋白的浓度（pg/mg prot或者ng/mg prot）。