解锁衰老密码：Elabscience®细胞衰老荧光法测试盒迎来流式新体验

细胞衰老是指正常细胞在内源性和外源性的压力下，进入永久性不可逆的细胞周期停滞状态的过程。其内在机制为：

①内源性压力是由于正常细胞经过多次DNA复制时，致使DNA损伤累积，最终导致染色质和端粒受损；

②外源性压力包括药物、氧化应激、细胞损伤、线粒体功能障碍等。在双重刺激下最终使正常细胞进入衰老状态。

根据具体情境不同，细胞衰老可能具有生理或病理意义。在生理层面，衰老细胞在肿瘤抑制和伤口愈合中发挥积极作用。而在病理层面，衰老细胞的异常积累与生物衰老及多种与年龄相关的疾病存在因果关系，靶向衰老细胞可治疗老年性疾病并延长健康寿命。

一、常用于检测细胞衰老的指标可分为三大类

① pH依赖性β-半乳糖苷酶活性升高；

② 细胞周期相关蛋白（如p21、p53、p16）表达上调，核纤层蛋白B1表达下降；

③ 衰老相关分泌表型（SASP）因子（如IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8）释放增加（如图1所示）。

图1. 细胞衰老常见的三种分子途径^[1]

目前最常用的衰老检测方法是评估β-半乳糖苷酶活性，主流方法包括显色法与荧光法。显色法依赖于X-gal的水解反应，通过观察二聚化发色团的沉淀来测定酶活性，但X-gal的细胞渗透性较差，且需人工计数蓝色细胞比例，结果易受主观影响。荧光法则更为精准，其采用双半乳糖基化荧光素（FDG），无荧光的FDG底物再与活细胞中的半乳糖苷酶反应后会生成强荧光性的荧光素，灵敏度高、更适合定量分析。

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图2. 用细胞衰老测试盒（货号：E-BC-F086）检测未经诱导（黑色边框直方图）与DOX诱导（灰色边框直方图）的Hela细胞衰老情况

图3. 1 mmol/L阿霉素(DOX)诱导与未诱导Hela细胞在FITC通道的荧光值强度对比

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参考文献

[1] González-Gualda E, Baker AG, Fruk L, Muñoz-Espín D. A guide to assessing cellular senescence in vitro and in vivo. Febs Journal, 2021.

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