10× Sodium Citrate Antigen Retrieval Solution (pH6.0)
中文名称:10× 柠檬酸钠抗原修复液 (pH6.0)

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- 应用性: IHC
产品简介 | 柠檬酸钠抗原修复液(Sodium Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽,导致IHC染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。因此,对于石蜡切片,在进行IHC染色前,要求先进行抗原修复,即将固定时分子间形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。柠檬酸钠缓冲液是一种最常用的IHC抗原修复液。 本抗原修复液采用了最广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明抗原修复也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 |
保存条件 | 室温保存,有效期12个月。 |
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Q1:本产品在稀释成工作液之后pH值会有变化吗?
本产品内含有缓冲盐溶液,由浓缩液稀释成工作液后pH值不会产生较大变化,无需再次调节pH值。
Q2:IHC实验,想知道抗原修复条件是什么?是用EDTA还是枸橼酸钾?
修复条件一般为高温高压或者微波加热修复。
例如:抗原修复(高压法) :压力锅中加入足以淹没切片的 10 mmol/ml 的枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0) (配制:将抗原修复液溶于相应体积 ddH2O中,混匀),加热至沸腾,切片置耐热塑料切片架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀,继续加热,设置保压 4 min,时间到后打开放气阀放气,压力归零后开锅盖将内锅取出放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片(约30 min)。
抗原修复(微波法) :烧杯中加入足以淹没切片的 10 mmol/ml 的枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0) (配制:将抗原修复液溶于相应体积 ddH2O中,混匀),加热至沸腾,切片置耐热塑料切片架上,放入烧杯中,中小火加热30min后取出,放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片(约30 min)。
IHC修复液的选择建议参考抗体使用说明书,或者参考以下方案:人体样本,优先推荐使用pH9.0的EDTA修复液(临床样本);大/小鼠样本,优先推荐使用pH6.0的枸橼酸修复液(科研样本)。
Q3:IHC在数据表上是什么意思?是冷冻切片吗?与IHC-F区别?
IHC是免疫组化实验,使用的切片一般包含有IHC-P(石蜡切片)和IHC-F(冰冻切片)两种。