5× SDS Loading Buffer
中文名称：5× SDS上样缓冲液
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- 应用性： WB
| 产品简介 | 本产品为5× SDS Loading Buffer电泳的蛋白质上样缓冲液。 主要成分包括SDS、溴酚蓝、还原剂等。加热状态下与蛋白质按比例混合使用，能够使蛋白质带上大量负电荷，消除其本身电荷差异；同时断开蛋白质分子内和分子间的氢键，二硫键等，破坏二、三级结构，从而控制蛋白质迁移速率只与其分子量大小相关。 本产品采用改良版还原剂替代具有刺激性气味和毒性的DTT，温和安全，使用效果更佳。 |
| 保存条件 | -20°C保存，保质期12个月；2-8°C，保质期6个月。 |
| 注意事项 | 1．本制品在-20℃保存时，可能会出现沉淀，必须完全溶解后再使用。如发现有沉淀等不溶物，可以在50℃水浴加热约5-15 min直至完全溶解。产品使用中请避免反复冻融，请按使用情况适当分装保存。 2．水浴加热混合样品时温度过高（如超过100℃）或时间过长（如超过15 min），有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。 3．使用本产品时会出现黏稠，挂壁，不易吸附等，属于正常现象。 4．本产品适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。 5．本产品仅限于专业人员的科学研究用。 6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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| E-IR-R304A | Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
| E-IR-R304B | High Accuracy and Absorbability Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
Q1:这款缓冲液主要成分有哪些呢？
本款产品中主要成分为Tris-HCl、溴酚蓝、SDS、DTT、甘油等。
Q2:跑胶结束后如何快速去除可能遮挡条带的溴酚蓝？
延长电泳时间可以使溴酚蓝与条带分开，对于小分子量蛋白建议更换浓度更适合的分离胶缓冲体系。
Q3:请问这个上样缓冲液适用于所有的蛋白电泳体系吗？
本产品适用于变性电泳的各种电泳缓冲液体系。
Q4:该产品对于蛋白浓度是否有要求？若蛋白浓度较高是否需要提高缓冲液的浓度？
本产品对蛋白浓度无具体要求，按比例稀释使用即可。
Q5:该产品中发现了沉淀，还可以继续使用吗？要如何处理呢？
若于上样缓冲液中发现沉淀，可于室温或37℃下溶解，沉淀完全溶解后可继续使用。溶解时不可长时间处于水浴中或直接煮沸，避免产品中某些组分变质。
Q6:蛋白自身的电荷是否会对缓冲液造成影响？
不会。缓冲液中的SDS可与蛋白质结合并使蛋白质-SDS复合物带上大量负电荷，将蛋白质本身的电荷完全覆盖。
Q7:蛋白煮沸变性后再加入蛋白上样缓冲液是否可行？
不建议进行这样的操作。煮沸后的蛋白不易与缓冲液完全混匀，影响电泳效果，先混匀蛋白与缓冲液再煮沸也利于蛋白的变性。使用时一般先将蛋白与上样缓冲液完全混合均匀后再进行煮沸变性。
Q8:蛋白样本加好上样缓冲液后，95°C煮 10min，14000 离心后，上样前个别样品会出现分层，是什么原因啊？
上样缓冲液使用前需要充分混匀后再使用，样本和上样缓冲液也需要充分混匀，充分混匀后再煮沸变性可避免此类情况发生。
Q9:蛋白样品加入缓冲液煮沸后为蓝色，放置-80℃后变成了蓝紫色，是什么原因？是否影响后续的电泳？
溴酚蓝会随pH值的变化在黄色到蓝紫色之间产生变化，不影响产品正常使用，发生类似变色情况不影响后续电泳情况，可继续进行实验。
Q10:若蛋白含有高分子杂带，可能存在二聚体，是否需要加入倍量缓冲液以打开二聚体？
如果蛋白样品中含有比较多的二聚体，可以添加还原剂DTT以帮助打开二聚体。
