5× SDS Loading Buffer
中文名称：5× SDS上样缓冲液
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- 应用性： WB
| 产品简介 | 本产品为5× SDS Loading Buffer电泳的蛋白质上样缓冲液。 主要成分包括SDS、溴酚蓝、还原剂等。加热状态下与蛋白质按比例混合使用，能够使蛋白质带上大量负电荷，消除其本身电荷差异；同时断开蛋白质分子内和分子间的氢键，二硫键等，破坏二、三级结构，从而控制蛋白质迁移速率只与其分子量大小相关。 本产品采用改良版还原剂替代具有刺激性气味和毒性的DTT，温和安全，使用效果更佳。 |
| 保存条件 | -20°C保存，保质期12个月；2-8°C，保质期6个月。 |
| 注意事项 | 1．本制品在-20℃保存时，可能会出现沉淀，必须完全溶解后再使用。如发现有沉淀等不溶物，可以在50℃水浴加热约5-15 min直至完全溶解。产品使用中请避免反复冻融，请按使用情况适当分装保存。 2．水浴加热混合样品时温度过高（如超过100℃）或时间过长（如超过15 min），有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。 3．使用本产品时会出现黏稠，挂壁，不易吸附等，属于正常现象。 4．本产品适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。 5．本产品仅限于专业人员的科学研究用。 6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| E-IR-R304A | Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
| E-IR-R304B | High Accuracy and Absorbability Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
Q11:若变性后样本浓度较高，该如何稀释呢？
可使用稀释至1×的缓冲液对变性后的样本进行稀释。
Q12:本产品在使用前需要额外添加巯基乙醇吗？
不需要，本产品中含有DTT，作用与巯基乙醇类似，起到还原剂的作用，但毒性也更低。
Q13:提取悬浮细胞蛋白质时，能否直接加入该产品煮沸变性？
可以使用1×缓冲液直接进行煮沸，但需要注意此操作后得到的蛋白上样缓冲液不可用于BCA测浓度。
Q14:已经加了loding buffer后煮至的蛋白，放-20°C能放一个月吗？
可以-20°C保存一个月，不过蛋白可能还是会有一定的降解，建议使用新鲜样本。
Q15:如果不小心将5×上样缓冲液煮沸了15min，是否还可以正常使用？
会对产品的效果产生一定的影响，可通过预实验验证产品是否可用。
Q16:如果不小心室温存放了一天还可以使用吗？
会对产品的效果产生一定的影响，可通过预实验验证产品是否可用。
Q17:可否用于非变性电泳？
不能，本产品含有DTT等还原剂，不可用于非变性电泳中。
Q18:加入缓冲液的蛋白煮样时无沉淀，但第二天取出加样时有沉淀出现是因为什么呢？该如何解决？
变性后的蛋白缓冲液出现沉淀可能与蛋白样品中的离子浓度有关系，在温度变化过程中出现沉淀，可通过37℃以下的水浴孵育溶解。若仍有少量沉淀无法溶解可离心后取上清使用。
Q19:加入缓冲液煮沸变性后的蛋白低温保存，再取出后还需要煮沸吗？为什么？
煮沸是为了蛋白变性，加入缓冲液煮沸后变性的蛋白已经完全变性，无需再进行煮沸，完全溶解后点样即可。
Q20:加入缓冲液变性后的蛋白在点样时容易难沉底容易飘起来是什么原因呢？该如何解决？
可能由于缓冲液中的甘油没完全混匀，建议缓冲液在室温或不超过37℃下完全溶解后再使用。
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