5× SDS Loading Buffer
中文名称：5× SDS上样缓冲液
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- 应用性： WB
| 产品简介 | 本产品为5× SDS Loading Buffer电泳的蛋白质上样缓冲液。 主要成分包括SDS、溴酚蓝、还原剂等。加热状态下与蛋白质按比例混合使用，能够使蛋白质带上大量负电荷，消除其本身电荷差异；同时断开蛋白质分子内和分子间的氢键，二硫键等，破坏二、三级结构，从而控制蛋白质迁移速率只与其分子量大小相关。 本产品采用改良版还原剂替代具有刺激性气味和毒性的DTT，温和安全，使用效果更佳。 |
| 保存条件 | -20°C保存，保质期12个月；2-8°C，保质期6个月。 |
| 注意事项 | 1．本制品在-20℃保存时，可能会出现沉淀，必须完全溶解后再使用。如发现有沉淀等不溶物，可以在50℃水浴加热约5-15 min直至完全溶解。产品使用中请避免反复冻融，请按使用情况适当分装保存。 2．水浴加热混合样品时温度过高（如超过100℃）或时间过长（如超过15 min），有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。 3．使用本产品时会出现黏稠，挂壁，不易吸附等，属于正常现象。 4．本产品适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。 5．本产品仅限于专业人员的科学研究用。 6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| E-IR-R304A | Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
| E-IR-R304B | High Accuracy and Absorbability Western Blot Detection Kit | 50 Assays |
Q21:加入缓冲液变性后的样品电泳时，若上样量多时跑不动，上样量少时跑得快单不整齐，该如何解决？
若蛋白条带移动速率不均匀，建议于37℃以下温浴中完全溶解上样缓冲液后再加入蛋白样品，与蛋白样品混合均匀后煮沸10分钟来完全变性蛋白样品。
若蛋白条带移动速度较慢，需及时检查电泳内槽是否漏液。
Q22:先用裂解液裂解完细胞后，以4:1体积加入5x上样缓冲液,然后水浴变性是用100度水浴还是用95度水浴更好？
100℃。
Q23:上样缓冲液是否会对电泳液的效果产生影响？如果不小心将缓冲液跑出去是否需要更换电泳液？
上样缓冲液会对电泳液产生影响，如果溢出量较少可忽略，如果溢出较多，需要及时更换新鲜电泳液，避免影响后续电泳效果。
同时为避免缓冲液溢出，建议在使用前置于37℃以下温度温浴完全溶解后再使用。
Q24:BCA浓度测得蛋白浓度3mg/ml，但加入缓冲液后发现无蛋白条带出现，是什么原因？
建议进行对比实验，设置BSA为阳性对照，与蛋白样本裂解液同时加入缓冲液混匀煮沸变性，上样进行电泳观察条带情况。
Q25:5 × SDS上样缓冲液，上样缓冲液是不是还原型？如何稀释样本问题？
货号E-BC-R288上样缓冲液是还原型的，还原型的里面有加DTT。
关于蛋白样本是否需要稀释，需要根据BCA检测浓度后确定，如果提取蛋白浓度大于5mg/mL可适当稀释，使用PBS稀释，使蛋白浓度在4-5mg/mL左右再制样。如果提取的蛋白浓度低于5mg/mL 可直接按说明书比例加loading buffer制样。
Q26:-20摄氏度下可以保存多久？4℃或者室温可以短暂存放吗？可以放在-80℃下保存吗？
-20℃下保存至少一年有效，4℃可存放1~2周左右，不建议于室温存放，可以在-80℃下保存。
为避免产品反复冻融对产品效果带来的负面影响，建议在收货后完全溶解产品后按需分装保存。
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