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产品常见问题

Elabscience® 整理汇集了抗体&蛋白产品应用过程中最常见问题的解答(FAQs),旨在更高效地为客户提供技术支持。

  • 不可以, 免疫共沉淀的细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液,常规的RIPA裂解含有SDS,会对蛋白产生变性作用,对蛋白间的相互作用有影响。做免疫共沉淀推荐使用不含变性剂的裂解液。

    如果是做磷酸化抗体,是必须加矾酸钠抑制剂,如果是做的普通抗体可以只加PMSF(蛋白酶抑制剂)。

    悬浮细胞:将细胞悬液转移到预冷的EP管中,4°C,1000×g离心10 min去上清,用2-8°C的PBS(0.01 M,pH 7.4)洗一次,再4°C,1000×g离心10 min去上清,沉淀备用。
    贴壁细胞:吸弃培养液,用2-8°C的PBS(0.01 M,pH 7.4)将细胞洗两遍。用细胞刮刮下细胞,或者用EDTA溶液处理使贴壁细胞松动,用移液器吹打下细胞,将细胞悬液转移到预冷的EP管中,4°C,1000×g离心10 min去上清,用2-8°C的PBS(0.01 M,pH 7.4)洗一次,再4°C,1000×g离心10 min去上清,沉淀备用。

    货号E-BC-R288上样缓冲液是还原型的,还原型的里面有加DTT。
    关于蛋白样本是否需要稀释,需要根据BCA检测浓度后确定,如果提取蛋白浓度大于5mg/mL可适当稀释,使用PBS稀释,使蛋白浓度在4-5mg/mL左右再制样。如果提取的蛋白浓度低于5mg/mL 可直接按说明书比例加loading buffer制样。

    可以-20°C保存一个月,不过蛋白可能还是会有一定的降解,建议使用新鲜样本。

    ECL可以用于ELISA实验,(ECL) 底物液是一款辣根过氧化物酶 (HRP) 底物,可用于检测辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白,具体的用量可参考说明书操作。

    不建议重复使用。

    这两个试剂主要区别是里面的脱蜡抗原修复二合一试剂的pH值不一样,E-IR-R220脱蜡修复一体液的pH值是pH 9.0,
    E-IR-R221脱蜡修复一体液的pH值是PH6.0。
    如果按一张片子100ul的用量计算,3mL最少可以做30张片子。客户可根据样本大小适当调整用量,试剂完全覆盖样本即可。
    我们这个盒子最大的优势就是这个脱蜡抗原修复二合一试剂,脱蜡抗原修复15-30分钟就可以完成。平时我们做IHC实验脱蜡加上抗原修复预计要一上午,并且我们试剂盒内的二抗和DAB都是超敏的,比传统的免疫组化试剂盒灵敏度高。

    我们快速超敏免疫组化检测试剂盒主要是适用于石蜡切片,如果做冰冻切片, 1-3步骤可不做,从第4个步骤是灭活开始操作。
    超敏免疫组化试剂盒视频:
    https://www.elabscience.cn/List-detail-16510.html。

    SP Reagent C 试剂是通用型二抗,是放在一管中共用一个试剂的,不是单独的;
     碱水:可用PBST、TBST,自来水冲洗,PH值大于7.0的缓冲液。苏木素复染后返蓝这一步也可以使用氨水,推荐浓度:0.25%氨水。

    如果客户的设备没有中小火,可以选择功率100-200W左右,维持液体微沸状态(就是维持在液体冒小泡泡即可)。

    -20℃下保存至少一年有效,4℃可存放1~2周左右,不建议于室温存放,可以在-80℃下保存。
    为避免产品反复冻融对产品效果带来的负面影响,建议在收货后完全溶解产品后按需分装保存。
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