产品常见问题
为了提供更好的客户支持,解决客户关于细胞代谢检测相关产品的疑问,我们整理并发布了关于细胞代谢检测产品最常见问题的解答(FAQs),并将持续更新。
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如果组织量不足0.1g,可按照说明书中的组织质量和匀浆液体积等比例减少,需要保证最终的样本匀浆后的体积足够线粒体复合物I检测和蛋白浓度的检测。组织样本需要进行匀浆处理,匀浆程度不同,释放出的蛋白浓度也不同,因此通过检测样本中的蛋白含量,可以校正样本匀浆过程中差异,保证测值的准确性,因此组织样本需要检测蛋白浓度。由于此试剂盒的反应速率比较快,对于时间的控制要求十分精确,因此建议一次测定的样本孔数不超过8个,以保证测值结果的准确性。如果每个样本做2个复孔,那一次检测的样本数量最好不要超过4个。不同样本间存在差异,试剂一具体使用浓度和作用时间及试剂二的具体使用浓度和刺激时间,需进行预实验探索,由预实验确定。试剂盒可以检测的样本数量取决于试剂一的浓度及用量。该试剂盒适用于检测活细胞ROS,组织匀浆处理后,细胞已经破碎死亡,因此该试剂盒不能检测组织匀浆。如果是新鲜组织样本,制备成单细胞悬液,可以检测。ROS试剂盒检测的是强绿色荧光,如果样本自身携带的荧光也是绿色的就有干扰,其他颜色的荧光对该试剂盒检测没有影响。E-BC-F002试剂盒,实验室验证过大肠杆菌,可以检测。E-BC-F003试剂盒是用的探针本身是红色的,随着脂质过氧化物水平的升高会从红色变成绿色,所以您可以检测红光,即流式细胞仪选择 cy3 通道,而不是选择FITC通道。但是需要注意探针浓度不能过高,建议您先选2-3个样本做下预实验试试。该试剂盒的试剂四(显色剂)在温度特别低的情况下会有这种粘稠物析出来,是正常情况,使用前先在37℃下孵育30min再使用。标准品是H2S,不含有其它蛋白,但是样本中存在一些对检测有干扰的蛋白,因此样本需要用试剂二和试剂四进行处理,但标准品不需要,所以标曲和样本测定的操作存在差异。这个试剂盒中,试剂一是用来形成沉淀的(试剂一含有大量的Zn离子会使蛋白变性析出);试剂二是溶解除了ZnS的其他沉淀;试剂三除了显色还可以溶解沉淀;试剂四除去样本蛋白,蛋白质对显色有干扰;试剂五就是形成亚甲基蓝。试剂四和试剂五是酸性,试剂二在后续操作过程中已经被洗干净,所以加入试剂五之后,反应体系是呈酸性的。