流式课堂
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双指数与对数在流式数据分析中的应用
常用的三种流式图的坐标轴显示方式,包括Linear(线性),Logarithmic(对数),Biex(双指数),本文重点介绍流式结果中坐标轴的显示方式、对数和双指数的转换及坐标轴的调整。
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抗体滴定如何做?一文全解析
使用流式抗体时,抗体浓度是最关键的参数。新手老师随意添加,容易产生背景染色过深、样本浪费等问题。为了达到更好的实验效果,节约宝贵的样本,我们需要进行抗体滴定。
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粘连体对流式实验结果的影响及排除方法
粘连体,是指两个或更多个细胞粘在一起(大多数是两个)的现象。理想状态下,细胞是一个一个通过流式细胞仪激光照射区的。现实情况下,由于各种原因,细胞与细胞会粘在一起,连续通过激光照射区,被仪器认定为一次信号。分析数据时,如果没有排除粘连体,就可能对结果的判断造成误导。本文给大家介绍粘连体对流式实验结果的影响及排除方法。
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易被忽略的CD4、CD8共表达细胞-胸腺淋巴细胞
在成熟的T淋巴细胞中,CD4和CD8是互斥的两个指标,通常情况下,二者不共表达,然而有一类CD4、CD8共表达的细胞,却常常被流式新手忽略——胸腺淋巴细胞。本文简要介绍了胸腺淋巴细胞的检测方案,利用CD4及CD8共表达进行检测,帮助加深对T淋巴细胞的了解。
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流式实验对照设置之FMO
FMO对照在设置圈门时具有重要的参考价值,一方面,FMO对照有助于精确地设置阴阳性群体界限,另一方面,FMO可以作为某些指标的阴性对照,用来排除全染的背景影响,便于更准确地划门。
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流式实验该准备多少管样本?如何设置对照?
本文总结6种常见的流式对照设置,并以CD3-APC、CD4-FITC、CD8-PE三色实验为示例,为大家提供样本管设置参考。
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流式对照设置之同型对照
同型对照,是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。本文介绍了同型对照的意义、使用范围及选择原则,帮助客户在流式实验中得到满意的实验结果。
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流式实验对照设置之单阳对照
多色流式实验中,由于不同荧光素的发射波长的覆盖范围不同,可能产生重叠,对实验结果的数据分析造成一定干扰,我们通常会设置单阳管进行调节补偿。同时,单阳管还可以辅助我们调节通道电压,防止信号超出接收范围。本文介绍了单阳管设置及单阳管常见问题,帮助客户在实验中利用单阳管得到满意的实验结果。
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联合CD45及SSC设门的意义
本文主要介绍CD45的特点,及通过CD45与SSC-H来圈出淋巴细胞亚群的意义,帮助客户在进行流式数据分析时更准确的圈出淋巴细胞亚群。
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人外周血调节性T细胞鉴定方案
Foxp3是目前公认的调节性T细胞最特异的指标,但因其位于细胞内,使得Foxp3的染色必须要固定细胞并破核膜。CD127属于细胞表面Marker,无需固定破膜。因此,当前主流方向是通过CD127来检测人Tregs。本文总结了人外周血调节性T细胞完整鉴定方案,包括配色方案、所需流式抗体、辅助试剂、样本管设置、实验步骤、实验结果等,帮助客户轻松鉴定人外周血调节性T细胞。