One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Red, Elab Fluor® 555)

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中文名称：一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒（红色，Elab Fluor® 555）

货号：E-CK-A325
文献（27）
说明书

说明书

One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Red, Elab Fluor® 555)

Price: ¥3600.00 ¥2000.00 ¥1500.00

Size:

100 Assays 50 Assays 20 Assays

应用： 细胞凋亡-DNA片段化

细胞凋亡检测试剂盒全线5折

2025-08-19 ~ 2025-09-30

实验操作

检测原理	细胞在发生凋亡时，会激活一些特异性的DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段，在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。TdT酶（脱氧核糖核酸末端转移酶）将标记的dUTP连接到断裂DNA暴露的3'-OH末端，通过在这些末端添加荧光dUTP的方式来标记晚期凋亡细胞，从而可以通过荧光显微镜进行检测。
检测方法	荧光法
样本类型	石蜡切片;冰冻切片;细胞爬片;细胞涂片
检测时间	3 hours
检测仪器	荧光显微镜
荧光	Elab Fluor®555
Ex/Em	555/565
Filter set	TRITC
自备试剂	4%多聚甲醛(E-IR-R113),0.2% Triton X-100(E-IR-R122),PBS(E-BC-R187),ddH2O,含抗荧光淬灭剂的封片液(E-IR-R119),二甲苯,无水乙醇
保存温度	该产品可在-20°C避光条件下保存12个月。
有效期	12个月
运输条件	冰袋

Paraffin embedded rat heart was treated with DNase I to fragment the DNA. DNA strand breaks showed intense fluorescent staining in DNase I treated sample (red). The cells were counterstained with DAPI (blue).This photo was taken by confocal microscope.

Paraffin embedded rat kidney was treated with DNase I to fragment the DNA. DNA strand breaks showed intense fluorescent staining in DNase I treated sample (red). The cells were counterstained with DAPI (blue).

Paraffin embedded mouse liver was treated with DNase I to fragment the DNA. DNA strand breaks showed intense fluorescent staining in DNase I treated sample (red). The cells were counterstained with DAPI (blue).

Fluorescence microscope analysis of camptothecin-induced apoptosis of Hela cells.

Mixed samples of normal mouse spleen cells and DNase I treated mouse spleen cells were stained.

Quercetin inhibits truncated isoform of dopamine- and cAMP-regulated phosphoprotein as adjuvant treatment for trastuzumab therapy resistance in HER2-positive breast cancer

IF: 5.6

Journal： Food Science and Human Wellness (2024)

DOI：10.26599/FSHW.2022.9250213
SOX9 Induces Orbital Fibroblast Activation in Thyroid Eye Disease Via MAPK/ERK1/2 Pathway

IF: 4.4

Journal： INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE (2024)

DOI：10.1167/iovs.65.2.25

PMID：38345552
Absence of the Klotho Function Causes Cornea Degeneration with Specific Features Resembling Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy and Bullous Keratopathy

IF: 4.2

Journal： Biology-Basel (2024)

DOI：10.3390/biology13030133

PMID：38534403
Effect of Myelin Debris on the Phenotypic Transformation of Astrocytes after Spinal Cord Injury in Rats

IF: 2.9

Journal： NEUROSCIENCE (2024)

DOI：10.1016/j.neuroscience.2024.03.026
Activation of regulatory dendritic cells by Mertk coincides with a temporal wave of apoptosis in neonatal lungs

IF: 24.8

Journal： Science Immunology (2023)

DOI：10.1126/sciimmunol.adc9081

PMID：37327322
Extracellular Matrix Stiffness Regulates Microvascular Stability by Controlling Endothelial Paracrine Signaling to Determine Pericyte Fate

IF: 8.7

Journal： ARTERIOSCLEROSIS THROMBOSIS AND VASCULAR BIOLOGY (2023)

DOI：10.1161/ATVBAHA.123.319119

PMID：37650330
Microplastic induces mitochondrial pathway mediated cellular apoptosis in mussel (Mytilus galloprovincialis) via inhibition of the AKT and ERK signaling pathway

IF: 7.0

Journal： Cell Death Discovery (2023)

DOI：10.1038/s41420-023-01740-3

PMID：38057300
TUNEL-positive structures in activated microglia and SQSTM1/p62-positive structures in activated astrocytes in the neurodegenerative brain of a CLN10 mouse model

IF: 6.2

Journal： GLIA (2023)

DOI：10.1002/glia.24449

PMID：37571859
LncRNA 220: A Novel Long Non-Coding RNA Regulates Autophagy and Apoptosis in Kupffer Cells via the miR-5101/PI3K/AKT/mTOR Axis in LPS-Induced Endotoxemic Liver Injury in Mice

IF: 5.6

Journal： INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES (2023)

DOI：10.3390/ijms241311210

PMID：37446388
ALKHB5-demethylated lncRNA SNHG15 promotes myeloma tumorigenicity by increasing chromatin accessibility and recruiting H3K36me3 modifier SETD2

IF: 5.5

Journal： AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY (2023)

DOI：10.1152/ajpcell.00348.2023

PMID：38145297

E-CK-A211	Annexin V-FITC/PI Apoptosis Kit	200 Assays , 100 Assays , 50 Assays , 20 Assays
E-CK-A301	Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (with JC-1)	100 Assays , 50 Assays , 20 Assays
E-CK-A362	Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)	500 Tests , 100 Tests , 500 Tests × 20
E-CK-A321	One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Green, Elab Fluor® 488)	100 Assays , 50 Assays , 20 Assays

Q11:我使用六孔板做TUNEL实验。我的阴性对照组已经加入DNase I Buffer平衡后，还需要加标记工作液进行标记吗？

阴性对照组需要进行样本标记步骤。但需要注意的是，阴性对照组标记工作液的配置试剂和其他两组不同。

Q12:您这边推荐的冰冻切片厚度是多少呢？

一般冰冻切片的厚度是在8-10 µm，太厚了可能会做不出来。如果切片较厚，通透时可根据实际情况适当延长蛋白酶K孵育时间。

Q13:如何进行TUNEL的荧光定量分析？

A视野荧光总强度除以A视野内细胞的总面积就是平均荧光强度。DAPI染色的是总DNA，TUNEL染色的是凋亡的断裂的DNA，所以DAPI染色代表的总面积，TUNEL染色代表的凋亡的DNA，总荧光亮度除以总DNA的面积，最终就得出了平均染色比率。

Q14:原位TUNEL试剂盒可以直接在细胞孔板里染色吗，不制备细胞爬片？

可以做细胞爬片、细胞涂片，也可以直接在孔板里直接检测，但是需要注意的是，因为孔板的底部可能会存在中间略高四周低的情况，所以加进去的试剂一定要完全覆盖住样本，并且保证在孵育过程中不干片，必要的时候可能需要用到高于说明书写的试剂用量。用孔板直接染色，最后观察需要用倒置显微镜观察，另外还需要注意的是不做爬片的话无法封片保存，需马上观察。

Q15:冰冻切片可以烘干吗？

冰冻切片千万不要烘干，切完放在-20或者-80保存，一周内使用-20保存可以，长期不用放在-80保存。实验前取出室温复温20分钟左右，在切片上滴加4%的多聚甲醛甲醛，室温固定30-60分钟后，再洗涤，按照说明书操作。

Q16:冰冻切片冰冻前进行过固定的，还需要做一步固定，在室温孵育30min吗？

如果已经固定过，则不需要再次孵育固定，可以直接进行后续实验步骤。

Q17:六孔板每孔需要多少体积的标记工作液？

每孔建议孵育500μL的标记工作液。

Q18:一步法TUNEL试剂盒可以检测精子样本吗？

可以用于检测精子样本。

Q19:TUNEL试剂盒，为啥在染标记工作之前要先用平衡液平衡一下？

平衡的目的是为了提前让切片/爬片处于TUNEL染色的最佳条件，让TUNEL染色更加充分彻底。

Q20:TUNEL试剂盒荧光拍照的注意事项？

在调整曝光强度的过程中，可以先将光照强度调到最低，从最低的曝光时间开始观察，逐渐增加曝光时间和荧光亮度，在荧光拍摄过程中注意调整光照强度和曝光时间，曝光过度，染料容易光漂白，造成过曝，合适的曝光条件为阴性对照无背景荧光，阳性对照不过曝，不同组的同一种荧光素的曝光条件需要保持一致，但不同荧光素的曝光条件可以不同。