流式课堂 | 破解T细胞激活难题：不同方法对比与高效解决方案

T细胞具备多种免疫学功能，其在基础生物学研究、细胞治疗、疾病造模和新药研发等领域具有重要应用。如何能高效激活以及扩增高质量和具有高功能性的T细胞呢？今天Elabscience带您一起对比不同的T细胞激活方式，并为您推荐一种高效、稳定且易于操作的解决方案，助您解决T细胞激活难题。

一、不同T细胞激活方式介绍

T细胞可通过抗原递呈细胞、植物凝集素、可溶性抗体及抗体包被磁珠等激活，不同激活方式对比如下：

二、T细胞激活磁珠产品介绍

Elabscience®提供不同T细胞激活磁珠产品，其中Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads用于人T细胞激活，Mouse CD3/CD28 T Cell Activation Beads用于小鼠T细胞激活。磁珠表面同时偶联CD3和CD28单抗，可提供T细胞活化与扩增所需的主要和协同刺激信号，从而诱导T细胞的活化与增殖。该磁珠可以通过使用磁力架从细胞中去除，从而进行后续的相关实验研究。

产品特点：

•  T细胞激活信号高，激活后细胞增殖能力强；

•  实验操作简便；

•  磁珠可以通过磁极从细胞中去除；

•  无需添加饲养层细胞（抗原递呈细胞）或额外抗原。

实验结果展示：

CD25和CD69是淋巴细胞激活标志物，使用Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads（MIH001A）与人T细胞共培养2天，通过流式细胞仪检测刺激前后CD25+CD69+T细胞的比例（图1）。激活前CD25+CD69+ T细胞占比为0.33% ，激活后CD25+CD69+T细胞占比为80.10%，表明大部分T细胞被激活。

图1. 激活前（左图）和激活2天后（右图）样本中T细胞CD25和CD69的表达结果

CFSE是一种能在细胞内不可逆结合并随细胞分裂递减的荧光染料，可用于检测细胞增殖。人T细胞培养前使用CFSE标记。未激活组T细胞培养3天后，仅有单一高信号峰（图2），而激活组添加了Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads（MIH001A）与T细胞共培养，3天后CFSE的荧光信号显著降低，有多个增殖峰（图2），表明该磁珠良好地刺激了T细胞在体外增殖。

图2. CFSE染T细胞后培养3天，检测未激活组（左图）和激活组（右图）T细胞增殖结

Elabscience®T细胞激活磁珠产品