Calcein AM/PI Double Staining Kit

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中文名称：Calcein AM/PI活死细胞双染试剂盒

货号：E-CK-A354
文献（49）
说明书

说明书

Price: ¥2000.00 ¥700.00 ¥300.00

Size:

2000 Assays 500 Assays 100 Assays

应用： 细胞活力/细胞毒性

检测原理	Elabscience^® Calcein AM/PI Double Staining Kit可用于区分含有酯酶活性的哺乳动物的死细胞和活细胞，Calcein AM 是在传统的Calcein上添加上乙酰甲氧基甲酯即（AM）基团，疏水性增加，能很容易穿透活细胞膜，进入细胞内。Calcein AM本身无荧光，进入细胞后被细胞中内源性酯酶水解，生成具有强负电荷且不能通过细胞膜的极性分子Calcein滞留在细胞内，而Calcein可发出强绿色荧光（Ex/Em= 494nm/517nm）。由于死细胞缺乏酯酶，不能或很少能产生Calcein，因此仅活细胞会被染色为强绿色荧光，死细胞不能被染色或者染色非常弱。死细胞的细胞膜选择透过性丧失，碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）可以进入胞内与双链DNA特异性结合并产生强烈的红色荧光（Ex/Em=535nm/617nm），从而对死细胞进行标记。因此，Calcein AM与碘化丙啶联合使用，可以对活细胞与死细胞同时进行双重荧光染色，可用于细胞活性与细胞毒性的检测。
检测方法	荧光法;流式
样本类型	细胞
检测时间	30 min
检测仪器	流式细胞仪;荧光显微镜
荧光	Calcein/PI
Ex/Em	494/517,535/617
Channel set	FITC, PE/PerCP/Cy5.5
Filter set	FITC, TRITC
自备试剂	PBS(E-BC-R187)
保存温度	该产品可在-20°C避光条件下保存12个月。
有效期	12个月
运输条件	冰袋

4T1 cells and Hela cells were treated with 5 % DMSO, 5μM Camptothecin, 10μM Camptothecin for 4h, then stained with Calcein-AM / PI Double Staining Kit and photographed.

Molt-4 cells were treated with 5 % DMSO and 10 % DMSO for 4h, then stained with Calcein-AM / PI Double Staining Kit and detected by flow cytometry.

Jurkat cells were placed at 4 °C for 20 days, then stained with Calcein-AM / PI Double Staining Kit and detected by flow cytometry.

Photo-stimulating dual-network microminiature hydrogels reinforced with silver sulfide nanoparticles for regulated cancer photothermal therapy

IF: 13.3

Journal： CHEMICAL ENGINEERING JOURNAL (2025)

DOI：10.1016/j.cej.2025.161836
Toxicity of stereolithography 3D printed objects at the chemical level and strategies to improve biocompatibility

IF: 10.3

Journal： Additive Manufacturing (2025)

DOI：10.1016/j.addma.2025.104715
Macrophage-related inflammatory responses to degradation products of biodegradable molybdenum implants

IF: 8.7

Journal： Materials Today Bio (2025)

DOI：10.1016/j.mtbio.2025.101519
A Versatile Immune Protective Armor to Enhance the Regenerative Potential of Exogenous Stem Cells

IF: 8.3

Journal： ACS Applied Materials & Interfaces (2025)

DOI：10.1021/acsami.5c00253
Cationic Azobenzene Tag to Enhance Liposomal Prodrug Retention and Tumor-Targeting Prodrug Activation for Improved Antitumor Efficacy

IF: 8.3

Journal： ACS Applied Materials & Interfaces (2025)

DOI：10.1021/acsami.5c01634
Regulating the balance between GSDMD-mediated pyroptosis and CHMP4B-dependent cell repair attenuates calcium oxalate kidney stone formation

IF: 8.2

Journal： International Journal of Biological Sciences (2025)

DOI：10.7150/ijbs.105415
Multiaction Antimicrobial, Anti-inflammatory, and Prohealing Hydrogel as a Novel Strategy for Preventing Postoperative Pancreatic Fistula

IF: 8.1

Journal： Biomaterials Research (2025)

DOI：10.34133/bmr.0194
Sauchinone Preserves Cardiac Function in Doxorubicin-Induced Cardiomyopathy by Inhibiting the NLRP3 Inflammasome

IF: 6.7

Journal： PHYTOMEDICINE (2025)

DOI：10.1016/j.phymed.2025.156624
Using Regular Porous Membrane-Based Blood–Brain Barrier Model to Screen Brain-Targeted Drugs with Nanochannel Electrochemistry

IF: 6.7

Journal： ANALYTICAL CHEMISTRY (2025)

DOI：10.1021/acs.analchem.5c00365
GelMA@LNP/AST Promotes eNOS-Dependent Angiogenesis Through Autophagy Activation for the Treatment of Hind Limb Ischemia

IF: 6.6

Journal： International Journal of Nanomedicine (2025)

DOI：10.2147/IJN.S499478

E-CK-A164	Calcein AM Solution (100 μM)	500 Tests , 100 Tests , 500 Tests × 10
E-CK-A165	Propidium Iodide (PI) Solution(750 μM)	500 Tests , 100 Tests , 500 Tests × 10
E-CK-A153	Calcein AM Assay Buffer	100 mL

Q1:除了Mn2+之外，还有哪些因素对钙黄绿素试剂盒有影响？

银离子，铜离子等重金属离子、卤素离子以及具有氧化性的有机化合物（硝基化合物、重氮化合物、羰基化合物和羟基化合物）都会使荧光探针的荧光淬灭，从而影响实验结果的准确性。

Q2:规格为100assays的Calcein AM/PI Double Staining Kit，24孔板可以做多少孔？

100 assays是按照96孔板，每孔100ul工作液来算的，24孔板每孔加200ul工作液，大概可以做50个孔左右。

Q3:收到试剂盒后分装冻存的建议方案（建议的最低体积、需不需用buffer溶解及浓度及方案的保存时间）是什么？可以将试剂使用buffer稀释到使用浓度再进行分装吗？

不建议把染料稀释后再分装，这样会导致Calcein AM水解，Calcein AM建议原液保存更稳定。Calcein AM原液可以根据需要进行分装，-80保存有效期更长，经常使用可以放在-20。使用buffer稀释后最好一天内用完，现配现用。

Q4:因为我的二抗是APC和PE ，calcein AM/PI活死染料做流式的话可以只染活细胞，上机的时候选择FITC通道可以吗？

理论上是可行的，但我们没验证过，建议您做预实验摸索一下实验细节。

Q5:咨询贵司的calcein AM/PI活死染料，是否可用于类器官药敏实验活性研究？我的类器官是悬浮在基质胶中，使用时是否需要将胶提前除去？

基质胶要去除，不去除可能会干扰钙黄绿素与细胞结合；但是我们的钙黄绿素试剂盒没有做过类器官的验证，不清楚最终效果是怎样的，建议先做预实验看一下实际效果。

Q6:Calcein+PI+双阳和calcein-PI-双阴性细胞分别说明了什么?

双阳的细胞是状态较差的活细胞，因为细胞膜的通透性增加导致核染料进入到细胞内。双阴的细胞是大颗粒的细胞碎片。

Q7:Calcein AM/PI中的染料容易淬灭吗？一般多长时间淬灭呢？

Calcein AM/PI活死双染试剂盒主要是活细胞染色，染色后1~2h内抓紧时间上机检测，时间太久细胞状态会变差。如果需要长期培养，在使用buffer染色后，避光在二氧化碳培养箱培养，最好在48h内检测。Calcein AM/PI比较稳定，荧光强度在上机检测的2小时内都没有降低的趋势。荧光显微镜拍照时，建议光强降低，增加曝光时间，拍完后马上关上荧光开关再换位置，染料会更稳定。因为光强太强，染料容易光漂白，就淬灭的快些。

Q8:Calcein AM/PI Double Staining Kit 100Assays可以做多少？

流式细胞仪检测：125个样（1~5×10^5 个细胞）
荧光显微镜检测：100个样（96孔板）、50个样（24孔板）

Q9: 钙黄绿素上机前为什么不用洗？

Calcein AM只有进入细胞内被细胞中内源性酯酶水解后才会有强荧光，未进入细胞的Calcein AM几乎没有荧光，所以上机前不需要洗。