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SMCC Activated R-PE

中文名称:SMCC活化的R-藻红蛋白

SMCC Activated R-PE
  • SMCC Activated R-PE

Price: ¥400.00 ¥999.00

Size:
250 μg 1 mg
  • 应用: 蛋白标记/抗体标记
Molecular Weight
240 KD
Absorption Maximum
565 nm
Emission Maximum
575 nm
产品介绍
SMCC-RPE is treated with SMCC under conditions that only 1~4 SMCC on one RPE ensuring the best yield of conjugate with minimal aggregates. This derivative protein has been purified to remove excess SMCC and lyophilized, making it quite suitable for long term storage without losing reactivity and keep high quality of RPE with perfect conjugation consistency.
Buffer
Lyophilized SMCC-RPE powder is prepared in 10 mM K-P buffer with sugar as additive. No ammonium sulfate or other material that may interfere conjugation is contained in this product.<
产品应用
蛋白标记/抗体标记
荧光光谱
Storage
该产品可在-20°C避光条件下保存6个月。
Shipping
蓝冰
Expiration date
6个月

Q1:假如我需要用SMCC活化的R-藻红蛋白(货号:E-FN-S102)标记一个抗体,然后把偶联有藻红蛋白的抗体用作ELISA,还需要哪些试剂呢?有具体的操作流程吗?

主要用到的化学试剂有0.1M PBS, EDTA二钠,NEM , 另有还原剂DTT或2-MEA,或TCEP ,还需要10kD超滤管或者脱盐柱。
根据抗体的特征,假定抗体是常规杂交瘤单克隆抗体(例如mouse IgG 2a ,150kDa),抗体在中性缓冲液(例如PBS+ EDTA,PH7.2)中,使用合适的量的DTT或者2-MEA 使其还原,暴露出-SH(巯基),再将SMCC活化的染料加入到还原后的抗体(按照一定比例)中, 37℃或者4℃过夜混合反应,后添加化学试剂盒例如NEM(N-Ethylmaleimide) 封闭反应 0.5 h左右,即完成标记;后续可根据实际情况确定是否进行进一步纯化操作。
另外也可以使用SATA,或者2-亚氨基硫烷盐酸盐处理抗体,后续再加入相关试剂(SATA需要盐酸羟胺等)激活出-SH(巯基), 再将SMCC活化的染料加入到活化的抗体(按照一定比例)中, 37℃或者4℃过夜混合反应,后添加化学试剂盒例如NEM(N-Ethylmaleimide) 封闭反应也是可以,这种方式不会将抗体还原,但是可能会干扰抗原抗体结合位点,步骤也比较繁琐一些。
具体选择哪种方式需要根据抗体的类别和特性来定。荧光染料的使用比例也需要设定预实验去摸索。

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