Annexin V-FITC/PI Apoptosis Kit
中文名称:Annexin V-FITC / PI细胞凋亡检测试剂盒

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- 应用: 细胞凋亡-Annexin V
检测原理 | Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。
细胞核染料(PI,DAPI,7-AAD)可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,细胞核染料(DAPI、PI、7-AAD)可进入细胞内对DNA进行染色,与Annexin V搭配使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。 |
检测方法 | 荧光法;流式 |
样本类型 | 细胞 |
检测时间 | 40 min |
检测仪器 | 流式细胞仪 |
荧光 | FITC |
Ex/Em | 490/530 |
Channel set | FITC |
自备试剂 | PBS(E-BC-R187), 去离子水 |
保存温度 | 该产品可在 2~8°C避光条件下保存12个月。 |
有效期 | 12个月 |
运输条件 | 冰袋 |
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E-CK-A111 | Annexin V-FITC Reagent | 500 Tests , 200 Tests , 100 Tests , 50 Tests |
E-CK-A212 | Annexin V-FITC/7-AAD Apoptosis Kit | 200 Assays , 100 Assays , 50 Assays , 20 Assays |
E-CK-A151 | Annexin V Binding Buffer (10×) | 50 mL , 10 mL |
E-CK-A301 | Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (with JC-1) | 100 Assays , 50 Assays , 20 Assays |
E-CK-A252 | Annexin V-FITC/DAPI Apoptosis Kit | 200 Assays , 100 Assays , 50 Assays , 20 Assays |
E-CK-A320 | One-step TUNEL In Situ Apoptosis Kit (Green, FITC) | 100 Assays , 50 Assays , 20 Assays |
Q11:Annexin V试剂盒能否用于贴壁细胞?
Annexin V试剂盒可以用于贴壁细胞,但是需要注意以下几点:
1. 贴壁细胞诱导细胞凋亡时出现的漂浮细胞也是需要收集起来的,与后续收集的贴壁细胞一起检测。
2. 消化贴壁细胞要操作轻柔,避免人为操作带来的细胞损伤。
3. 胰酶消化的时间要适宜。尽量不使用含EDTA的胰酶,因为EDTA会影响Annexin V与PS的结合。如果一定要用含EDTA的胰酶,终止消化后要将细胞洗涤干净,尽量去除EDTA。
Q12:Annexin V试剂盒能否检测血液样本?
不建议检测血液样本,血液中血小板及很多免疫细胞自身存在PS外翻的情况,会影响检测结果。
Q13:Annexin V试剂盒可以直接检测冻存细胞吗?
不建议使用Annexin V试剂盒直接检测冻存细胞,冻存操作可能会导致细胞凋亡坏死,得到不准确的实验结果。
Q14:Annexin V试剂盒可以检测植物样品吗?
我司没有进行过植物样本的验证,如果您有需的话,可以做预实验看下效果。
Q15:Annexin V的实验温度选择4℃可以吗?
建议室温孵育,25℃左右。Annexin V实验的染色过程实际上是使AnnexinV蛋白与细胞膜上的磷脂酰丝氨酸特异结合的过程,这个过程在细胞功能和酶活性正常的状态下进行为宜。
Q16:Annexin V可以做小鼠海马组织细胞凋亡吗?
不建议老师使用组织样本做Annexin V实验。一方面,组织样本制备成单细胞悬液的操作过程中,实验操作导致的凋亡可能比样本本身的凋亡率高,而且实验操作具有不稳定性,最终的实验无法判断出样本本身的实际凋亡率。另一方面,组织样本存在多种细胞类型,每种细胞的自发荧光不同,结果无法分析。
Q17:Annexin V凋亡检测试剂盒中一步法和两步法的区别?
一步法操作更简单,两步法由于减小了孵育体系,所以染料用量减半,更节省试剂,从结果上来看,一步法与两步法的结果分辨率一致。
