产品常见问题
为了提供更好的客户支持,解决客户关于细胞功能检测相关产品的疑问,我们整理并发布了关于细胞功能检测产品最常见问题的解答(FAQs),并将持续更新。
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不需要,抗原修复后会导致核酸断裂,出现阳性信号。冰冻切片千万不要烘干,切完放在-20或者-80保存,一周内使用-20保存可以,长期不用放在-80保存。实验前取出室温复温20分钟左右,在切片上滴加4%的多聚甲醛甲醛,室温固定30-60分钟后,再洗涤,按照说明书操作。TUNEL试剂盒中的平衡液是为了给TdT酶提供最佳反应条件。建议用超纯水稀释,不能用DEPC水稀释,DEPC水是用来保护RNA或者DNA不被酶解的,用它来稀释DNA酶,DNA酶就失效了,提取RNA的时候可以用这个DEPC水来溶解RNA。可以浸泡在PBS中于4℃过夜。如果已经固定过,则不需要再次孵育固定,可以直接进行后续实验步骤。不能用中性树胶,因为切片染色完毕后,是处于水溶性状态,要用水溶性的封片剂,中性树胶是非水溶性封片剂,封片了之后会糊成一团,片子被破坏,用抗荧光淬灭封片剂来封片即可。可以,如果用含DAPI的封片剂,就不需要用试剂盒中包含的DAPI染料,并且由于DAPI孵育后没有清洗,会造成较高的背景荧光。不能。TUNEL的原理是将荧光标记的dUTP连接到断裂DNA的3'-OH末端上,已经做过一次TUNEL实验的切片样本,其3'-OH末端可能已经被占用了。具有高增殖或代谢活性细胞群,可能会存在DNA链的断裂,在这两种情况下,假阳性结果可能是样本本身带来的。当客户对结果的解释存疑时,细胞形态学的评价是一个重要的参数。组织透明,玻片不挂水即为脱蜡干净。A视野荧光总强度除以A视野内细胞的总面积就是平均荧光强度。DAPI染色的是总DNA,TUNEL染色的是凋亡的断裂的DNA,所以DAPI染色代表的总面积,TUNEL染色代表的凋亡的DNA,总荧光亮度除以总DNA的面积,最终就得出了平均染色比率。