产品常见问题
为了提供更好的客户支持，解决客户关于细胞功能检测相关产品的疑问，我们整理并发布了关于细胞功能检测产品最常见问题的解答（FAQs），并将持续更新。
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可以在药物孵育结束后，加入CCK-8之前更换培养基，以此来消除药物颜色的影响。IC50指的是半抑制率，可以用CCK8检测，凋亡实验检测的是凋亡率，这个不等同于IC50。这两个实验的实验目的是不一样的。BrdU法步骤繁多，且需要使用BrdU抗体，影响因素较多，稳定性较差。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应，无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高，是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法，将会逐步取代BrdU法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名5-乙炔基-2-脱氧尿苷，是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸腺嘧啶脱氧核苷掺入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针（如FITC Azide、Elab Fluor® 488 Azide、Elab Fluor® 594 Azide、Elab Fluor® 647 Azide），通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应（Click reaction）。不能。Elab Fluor® 594-11-dUTP只是单一组分，而Labeling Solution是包含了标记dUTP的多组分混合试剂。所以建议客户直接购买TUNEL试剂盒进行实验。①实验样本不含荧光，所有的TUNEL试剂盒都可以使用。②如果实验样品带红光，推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Green, FITC) 货号：E-CK-A320或者One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488) 货号：E-CK-A320。
一般来说，Elab Fluor®488的抗淬灭效果优于FITC，如果需要长时间观察样本的绿色荧光推荐使用One-step TUNEL Assay Kit (Green, Elab Fluor®488)。
③如果实验样本带绿光，推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®594) 货号：E-CK-A322或者One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®555) 货号：E-CK-A325。Elab Fluor®594与GFP的干扰更小，如果样本所带绿色荧光较强，优先推荐选择One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®594) 货号：E-CK-A322。
④如果实验样品中同时有红色荧光和绿色荧光，推荐选用One-step TUNEL Assay Kit (Red, Elab Fluor®647) 货号：E-CK-A324，但是Elab Fluor®647对荧光显微镜要求比较高，需要显微镜配置有Cy5或Elab Fluor®647滤光片，一般共聚焦显微镜配置有该滤光片。每孔建议孵育500μL的标记工作液。阴性对照组需要进行样本标记步骤。但需要注意的是，阴性对照组标记工作液的配置试剂和其他两组不同。DAPI染色时要求DAPI工作液覆盖样本即可。可以洗涤后浸泡在PBS中，放在4℃冰箱保存。可以的，这个-80冻存的样本可以制作成冰冻切片，然后用冰冻切片做tunel检测即可。一般冰冻切片的厚度是在8-10 µm，太厚了可能会做不出来。如果切片较厚，通透时可根据实际情况适当延长蛋白酶K孵育时间。制作石蜡切片的过程需要烤片，但是切片制作完毕之后做tunel染色的过程不需要烤片。
