产品常见问题
为了提供更好的客户支持，解决客户关于细胞功能检测相关产品的疑问，我们整理并发布了关于细胞功能检测产品最常见问题的解答（FAQs），并将持续更新。
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理论上来说，固定后置于-20℃冰箱放置两到三天，对结果影响不大。如果老师的样本不含荧光，红绿蓝荧光的细胞周期试剂盒都可以使用，红色荧光试剂盒（E-CK-A351）更常用。如果样本带绿色荧光，选用细胞周期蓝色荧光试剂盒（E-CK-A353），无需调节补偿。如果样本带红色荧光，推荐选用细胞周期蓝色荧光试剂盒（E-CK-A353）和细胞周期绿色荧光试剂盒 （E-CK-A352）；如果样本带红色和绿色荧光，推荐选用细胞周期蓝色荧光试剂盒（E-CK-A353）。选择E-CK-A353前应先确认流式细胞仪是否有DAPI通道。使用的荧光染料不一样，所以对流式细胞仪的检测通道要求和适用的样本不同。红色荧光的检测通道是PI,PerCP,PE，绿色荧光的检测通道是FITC，蓝色荧光的检测通道是DAPI。
银离子，铜离子等重金属离子、卤素离子以及具有氧化性的有机化合物 （硝基化合物、重氮化合物、 羰基化合物和羟基化合物）都会使荧光探针的荧光淬灭，从而影响实验结果的准确性。100 assays是按照96孔板，每孔100ul工作液来算的，24孔板每孔加200ul工作液，大概可以做50个孔左右。基质胶要去除，不去除可能会干扰钙黄绿素与细胞结合；但是我们的钙黄绿素试剂盒没有做过类器官的验证，不清楚最终效果是怎样的，建议先做预实验看一下实际效果。理论上是可行的，但我们没验证过，建议您做预实验摸索一下实验细节。双阳的细胞是状态较差的活细胞，因为细胞膜的通透性增加导致核染料进入到细胞内。双阴的细胞是大颗粒的细胞碎片。蛋白浓度在1~4mg/mL区间范围内，Caspase活性的范围为2~430 U/ng prot。组织样本用干冰冻了之后，基本上细胞形态可能已经被破坏了，无法使用流式检测。可以看看相关研究的ELISA或者代谢的指标，比如凋亡的Bax，Caspase或者氧化应激的SOD，MDA等。①显微镜参数一致；②溶解buffer，观察有无红色小颗粒，如果buffer不溶解，可通过12000rpm离心，取上清。③凋亡细胞贴壁能力较弱，会漂浮在培养基中，如果使用荧光显微镜检测，结果相对不准确，建议优先使用流式细胞仪检测；④收集细胞前，拍100x白光照片（小细胞拍200x，比如淋巴细胞）查看形态学变化。我们不建议用组织样本制备单细胞悬液去做JC-1，制备单细胞悬液的操作对细胞的影响较大，会直接影响JC-1的实验结果。
