产品常见问题
为了提供更好的客户支持，解决客户关于细胞功能检测相关产品的疑问，我们整理并发布了关于细胞功能检测产品最常见问题的解答（FAQs），并将持续更新。
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样本带绿色荧光不太适合用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位，因为GFP荧光对FITC和PE通道都有干扰，建议用与GFP没有荧光溢漏的线粒体探针进行检测。我们的产品暂时没有在荧光酶标仪上验证过，结果分析方法待开发。不能，染色完后尽量1h内检测上机，若细胞染色完固定，细胞膜的通透性会改变，会影响线粒体膜电位，导致结果不准确。您好，JC-1主要是检测线粒体膜电位变化的，但线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性时间，发生在细胞核凋亡特征出现之前，所以这说明了您细胞正处于凋亡发生早期而还未进入凋亡晚期。平衡的目的是为了提前让切片/爬片处于TUNEL染色的最佳条件，让TUNEL染色更加充分彻底。CCK-8试剂盒的OD值在0.2~2.5之间具有良好的线性关系可以的，对于流式来说；1% Saponin的通透效果会温和一点；Triton X-100的通透效果会剧烈一点，可能影响结果，不同的样本可能有差异。
建议用0.2%Triton X-100加上3%BSA（PBS配制）来通透细胞，然后离心力一定要注意升速和降速，升速不要超过3，降速不要超过2。这样细胞状态好些，得率高些。1-3% BSA都可以；太低了不行 发挥不了保护载体的作用。Calcein AM/PI活死双染试剂盒主要是活细胞染色，染色后1~2h内抓紧时间上机检测，时间太久细胞状态会变差。如果需要长期培养，在使用buffer染色后，避光在二氧化碳培养箱培养，最好在48h内检测。Calcein AM/PI比较稳定，荧光强度在上机检测的2小时内都没有降低的趋势。荧光显微镜拍照时，建议光强降低，增加曝光时间，拍完后马上关上荧光开关再换位置，染料会更稳定。因为光强太强，染料容易光漂白，就淬灭的快些。在调整曝光强度的过程中，可以先将光照强度调到最低，从最低的曝光时间开始观察，逐渐增加曝光时间和荧光亮度，在荧光拍摄过程中注意调整光照强度和曝光时间，曝光过度，染料容易光漂白，造成过曝，合适的曝光条件为阴性对照无背景荧光，阳性对照不过曝，不同组的同一种荧光素的曝光条件需要保持一致，但不同荧光素的曝光条件可以不同。可以做细胞爬片、细胞涂片，也可以直接在孔板里直接检测，但是需要注意的是，因为孔板的底部可能会存在中间略高四周低的情况，所以加进去的试剂一定要完全覆盖住样本，并且保证在孵育过程中不干片，必要的时候可能需要用到高于说明书写的试剂用量。用孔板直接染色，最后观察需要用倒置显微镜观察，另外还需要注意的是不做爬片的话无法封片保存，需马上观察。
1T当做2T用可以，按照说明书两步法操作，但细胞量不要超过5 x10^5个细胞。3%BSA的作用是在缓冲液给细胞提供载体支撑，减少细胞在离心、洗涤等过程中的机械损伤以及降低细胞损失。悬浮细胞需要用到，如果是贴壁细胞在孔板中检测可以用PBS替代。
